中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2009年
3期
180-185
,共6页
吕元%邓春平%黄冰%郭中敏%钟翎
呂元%鄧春平%黃冰%郭中敏%鐘翎
려원%산춘평%황빙%곽중민%종령
p16基因%甲基化%脱氢表雄酮%HBx%细胞周期%细胞凋亡
p16基因%甲基化%脫氫錶雄酮%HBx%細胞週期%細胞凋亡
p16기인%갑기화%탈경표웅동%HBx%세포주기%세포조망
目的 探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用.方法 以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平.比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系.结果 HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高(P<0.05),G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化, HepG2和 HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化.100 μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P<0.05),凋亡率提高(P<0.05).DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响.结论 HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现.
目的 探討HBx與p16基因甲基化的關繫,研究脫氫錶雄酮(DHEA)對p16基因甲基化以及細胞週期和細胞凋亡的調節作用.方法 以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三種細胞為材料,採用MTT法檢測細胞生長;流式細胞術檢測細胞週期和凋亡率;MSP-PCR檢測p16基因甲基化水平.比較分析HBx與p16基因啟動子甲基化、DHEA與各檢測指標的關繫.結果 HepG2/GFP-HBx細胞與HepG2細胞和HepG2/GFP細胞相比,細胞的增殖速度提高(P<0.05),G0/G1期細胞減少,S期細胞增多(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);HepG2/GFP-HBx細胞的p16基因啟動子呈現高水平甲基化, HepG2和 HepG2/GFP細胞呈現高水平非甲基化.100 μmol/L的DHEA使三種細胞的增殖速度降低(P<0.05),G0/G1期細胞增加,S期細胞減少(P<0.05),凋亡率提高(P<0.05).DHEA可下調HepG2/GFP-HBx細胞的p16基因啟動子甲基化水平,但對HepG2和HepG2/GFP細胞的p16基因啟動子甲基化水平不產生影響.結論 HBx引起肝癌細胞p16基因甲基化,併縮短細胞週期抑製細胞凋亡;DHEA可明顯下調HBx引起的p16基因甲基化水平,延長細胞週期促進細胞凋亡,在無HBx基因整閤的情況下,DHEA對肝癌細胞生長、細胞週期和凋亡的影響不通過p16基因甲基化的途徑實現.
목적 탐토HBx여p16기인갑기화적관계,연구탈경표웅동(DHEA)대p16기인갑기화이급세포주기화세포조망적조절작용.방법 이HepG2、HepG2/GFP화HepG2/GFP-HBx삼충세포위재료,채용MTT법검측세포생장;류식세포술검측세포주기화조망솔;MSP-PCR검측p16기인갑기화수평.비교분석HBx여p16기인계동자갑기화、DHEA여각검측지표적관계.결과 HepG2/GFP-HBx세포여HepG2세포화HepG2/GFP세포상비,세포적증식속도제고(P<0.05),G0/G1기세포감소,S기세포증다(P<0.05),조망솔강저(P<0.05);HepG2/GFP-HBx세포적p16기인계동자정현고수평갑기화, HepG2화 HepG2/GFP세포정현고수평비갑기화.100 μmol/L적DHEA사삼충세포적증식속도강저(P<0.05),G0/G1기세포증가,S기세포감소(P<0.05),조망솔제고(P<0.05).DHEA가하조HepG2/GFP-HBx세포적p16기인계동자갑기화수평,단대HepG2화HepG2/GFP세포적p16기인계동자갑기화수평불산생영향.결론 HBx인기간암세포p16기인갑기화,병축단세포주기억제세포조망;DHEA가명현하조HBx인기적p16기인갑기화수평,연장세포주기촉진세포조망,재무HBx기인정합적정황하,DHEA대간암세포생장、세포주기화조망적영향불통과p16기인갑기화적도경실현.
