重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2009年
4期
434-435
,共2页
张玉诺%周琦%刘方欣%何清义
張玉諾%週琦%劉方訢%何清義
장옥낙%주기%류방흔%하청의
bcl-2基因%shRNA%重组质粒%序列分析
bcl-2基因%shRNA%重組質粒%序列分析
bcl-2기인%shRNA%중조질립%서렬분석
目的 利用pgenesil-1质粒载体,以bcl-2为靶基因,设计构建重组体,以用于后继的RNA干扰研究.方法 设计3对有小发夹结构的两条DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体pgenesil-1上构建重组体,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切电泳鉴定后,进行测序分析.结果 将合成的DNA片段退火后克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的 序列.结论 靶向bcl-2基因转录shRNA的重组质粒可以在体外成功构建,为下一步利用该重组体干扰肿瘤细胞中bcl-2的mRNA转录,探索肿瘤基因治疗的新途径打下基础.
目的 利用pgenesil-1質粒載體,以bcl-2為靶基因,設計構建重組體,以用于後繼的RNA榦擾研究.方法 設計3對有小髮夾結構的兩條DNA序列,經退火形成互補雙鏈,剋隆至轉錄載體pgenesil-1上構建重組體,轉化DH5a菌株,提取質粒行酶切電泳鑒定後,進行測序分析.結果 將閤成的DNA片段退火後剋隆至載體上,經酶切及序列鑒定為目的 序列.結論 靶嚮bcl-2基因轉錄shRNA的重組質粒可以在體外成功構建,為下一步利用該重組體榦擾腫瘤細胞中bcl-2的mRNA轉錄,探索腫瘤基因治療的新途徑打下基礎.
목적 이용pgenesil-1질립재체,이bcl-2위파기인,설계구건중조체,이용우후계적RNA간우연구.방법 설계3대유소발협결구적량조DNA서렬,경퇴화형성호보쌍련,극륭지전록재체pgenesil-1상구건중조체,전화DH5a균주,제취질립행매절전영감정후,진행측서분석.결과 장합성적DNA편단퇴화후극륭지재체상,경매절급서렬감정위목적 서렬.결론 파향bcl-2기인전록shRNA적중조질립가이재체외성공구건,위하일보이용해중조체간우종류세포중bcl-2적mRNA전록,탐색종류기인치료적신도경타하기출.
