军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2008年
5期
401-405
,共5页
李鹏%尚明美%王强%付洁%宋海峰%刘秀文%汤仲明
李鵬%尚明美%王彊%付潔%宋海峰%劉秀文%湯仲明
리붕%상명미%왕강%부길%송해봉%류수문%탕중명
HER-2%硫代反义寡核苷酸%实时定量PCR%亚细胞分布%转录,遗传%转染%细胞核
HER-2%硫代反義寡覈苷痠%實時定量PCR%亞細胞分佈%轉錄,遺傳%轉染%細胞覈
HER-2%류대반의과핵감산%실시정량PCR%아세포분포%전록,유전%전염%세포핵
目的:研究靶向HER-2基因、具有不同活性的反义硫代寡核苷酸(S-ODNs)在SK-BR-3细胞内的微观分布差异,以及与靶基因转录和翻译抑制作用的关系.方法:运用实时定量PCR和Western印迹方法检测反义寡核苷酸对细胞靶基因转录和翻译抑制的时相性变化,用激光扫描共聚焦显微镜(LSM)观察6-羧基荧光素标记S-ODNs在靶细胞内的分布.结果:反义S-ODNs能够在mRNA与蛋白水平抑制HER-2的表达.不同序列的抑制活性各不相同,但最大抑制强度均出现于转染后48～72 h之间,此后靶基因表达逐渐恢复.高活性序列主要均匀分布于细胞核,且持续时间长,低活性序列呈点状分布于胞质,少量分布于细胞核且持续时间短.结论:活性不同的S-ODNs亚细胞分布有显著区别,且分布变化与对靶基因的抑制效应具有对应关系.
目的:研究靶嚮HER-2基因、具有不同活性的反義硫代寡覈苷痠(S-ODNs)在SK-BR-3細胞內的微觀分佈差異,以及與靶基因轉錄和翻譯抑製作用的關繫.方法:運用實時定量PCR和Western印跡方法檢測反義寡覈苷痠對細胞靶基因轉錄和翻譯抑製的時相性變化,用激光掃描共聚焦顯微鏡(LSM)觀察6-羧基熒光素標記S-ODNs在靶細胞內的分佈.結果:反義S-ODNs能夠在mRNA與蛋白水平抑製HER-2的錶達.不同序列的抑製活性各不相同,但最大抑製彊度均齣現于轉染後48～72 h之間,此後靶基因錶達逐漸恢複.高活性序列主要均勻分佈于細胞覈,且持續時間長,低活性序列呈點狀分佈于胞質,少量分佈于細胞覈且持續時間短.結論:活性不同的S-ODNs亞細胞分佈有顯著區彆,且分佈變化與對靶基因的抑製效應具有對應關繫.
목적:연구파향HER-2기인、구유불동활성적반의류대과핵감산(S-ODNs)재SK-BR-3세포내적미관분포차이,이급여파기인전록화번역억제작용적관계.방법:운용실시정량PCR화Western인적방법검측반의과핵감산대세포파기인전록화번역억제적시상성변화,용격광소묘공취초현미경(LSM)관찰6-최기형광소표기S-ODNs재파세포내적분포.결과:반의S-ODNs능구재mRNA여단백수평억제HER-2적표체.불동서렬적억제활성각불상동,단최대억제강도균출현우전염후48～72 h지간,차후파기인표체축점회복.고활성서렬주요균균분포우세포핵,차지속시간장,저활성서렬정점상분포우포질,소량분포우세포핵차지속시간단.결론:활성불동적S-ODNs아세포분포유현저구별,차분포변화여대파기인적억제효응구유대응관계.
