草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2008年
6期
580-584,589
,共6页
王康%董宽虎%孙彦%康俊梅%董洁%孟林
王康%董寬虎%孫彥%康俊梅%董潔%孟林
왕강%동관호%손언%강준매%동길%맹림
马蔺%ISSR-PCR%反应体系%正交优化
馬藺%ISSR-PCR%反應體繫%正交優化
마린%ISSR-PCR%반응체계%정교우화
根据正交试验设计原理,设计探索正交试验和细调正交试验以确定马蔺(Iris lacteal Pall. var. chinensis (Fisch.) Koidz) ISSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Primers、Mg2+ 4种因素对马蔺ISSR反应体系进行了优化,得到适合马蔺的ISSR-PCR最佳反应体系,即25 μl的反应体系中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Primers 0.4 μmol/L、Mg2+ 2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模板DNA.通过对马蔺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为52℃.这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究马蔺遗传多样性奠定了基础.
根據正交試驗設計原理,設計探索正交試驗和細調正交試驗以確定馬藺(Iris lacteal Pall. var. chinensis (Fisch.) Koidz) ISSR-PCR反應體繫中各成分的濃度,從dNTP、Taq酶、Primers、Mg2+ 4種因素對馬藺ISSR反應體繫進行瞭優化,得到適閤馬藺的ISSR-PCR最佳反應體繫,即25 μl的反應體繫中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Primers 0.4 μmol/L、Mg2+ 2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模闆DNA.通過對馬藺ISSR-PCR最佳反應體繫進行梯度退火試驗,得到這條引物的最佳退火溫度為52℃.這一體繫的建立為今後利用ISSR標記技術研究馬藺遺傳多樣性奠定瞭基礎.
근거정교시험설계원리,설계탐색정교시험화세조정교시험이학정마린(Iris lacteal Pall. var. chinensis (Fisch.) Koidz) ISSR-PCR반응체계중각성분적농도,종dNTP、Taq매、Primers、Mg2+ 4충인소대마린ISSR반응체계진행료우화,득도괄합마린적ISSR-PCR최가반응체계,즉25 μl적반응체계중함유dNTP 0.3 mmol/L、Taq매1.5 U、Primers 0.4 μmol/L、Mg2+ 2.5 mmol/L이급1×buffer화50 ng모판DNA.통과대마린ISSR-PCR최가반응체계진행제도퇴화시험,득도저조인물적최가퇴화온도위52℃.저일체계적건립위금후이용ISSR표기기술연구마린유전다양성전정료기출.
