CAJ | 학술논문

目的:利用TaqMan PCR技术,建立乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)实时荧光PCR检测方法,探讨其用于临床诊断的可行性.方法:根据GenBank发表的JEV全基因组序列资料分析结果,在其3'端非编码区(UTR)设计JEV特异的引物与探针,验证检测体系的特异性、灵敏性和稳定性,并用于临床乙脑病人样本的检测.结果:引物、探针具有良好的特异性,用该TaqMan PCR法检测JEV减毒株SA14-14-2灵敏度可达1 TCID50/ml.稳定性分析表明,同一样本重复检测5次,Ct值变异系数均小于5%.在此基础上,实时荧光PCR检测了10份临床上确诊为乙脑患者的标本(特异性IgM阳性),6份阳性,阳性率为60%.在7份特异性IgM阴性、临床上疑似乙脑的患者中,2份TaqMan PCR结果为阳性,阳性率为28.6%.此方法从RNA提取到检测结果仅需1.5 h.结论:本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的JEV TaqMan PCR检测方法,为乙型脑炎的鉴别诊断提供了一种技术手段.
목적:이용TaqMan PCR기술,건립을형뇌염병독(Japanese encephalitis virus,JEV)실시형광PCR검측방법,탐토기용우림상진단적가행성.방법:근거GenBank발표적JEV전기인조서렬자료분석결과,재기3'단비편마구(UTR)설계JEV특이적인물여탐침,험증검측체계적특이성、령민성화은정성,병용우림상을뇌병인양본적검측.결과:인물、탐침구유량호적특이성,용해TaqMan PCR법검측JEV감독주SA14-14-2령민도가체1 TCID50/ml.은정성분석표명,동일양본중복검측5차,Ct치변이계수균소우5%.재차기출상,실시형광PCR검측료10빈림상상학진위을뇌환자적표본(특이성IgM양성),6빈양성,양성솔위60%.재7빈특이성IgM음성、림상상의사을뇌적환자중,2빈TaqMan PCR결과위양성,양성솔위28.6%.차방법종RNA제취도검측결과부수1.5 h.결론:본연구건립료일충령민、특이、간편역행적JEV TaqMan PCR검측방법,위을형뇌염적감별진단제공료일충기술수단.