中国运动医学杂志
中國運動醫學雜誌
중국운동의학잡지
CHINESE JOURNAL OF SPORTS MEDICINE
2008年
1期
72-77
,共6页
陈连旭%傅欣%王海军%林霖%魏学磊%张继英%于长隆
陳連旭%傅訢%王海軍%林霖%魏學磊%張繼英%于長隆
진련욱%부흔%왕해군%림림%위학뢰%장계영%우장륭
NF-κBp65%siRNA%IL-1β%软骨细胞%NOS-2%COX-2
NF-κBp65%siRNA%IL-1β%軟骨細胞%NOS-2%COX-2
NF-κBp65%siRNA%IL-1β%연골세포%NOS-2%COX-2
目的:筛选有效的核因子-κB(NF-κB)p65特异性小干扰核糖核酸(siRNA),优化反应条件,用来抑制白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞中一氧化氮合酶-2(NOS-2)和环氧合酶-2(COX-2)的表达,探讨siRNA技术在关节炎治疗方面的应用.方法:体外转录合成NF-κBp65特异性siRNA,质脂体转染软骨细胞,筛选出有效的siRNA.将筛选的siRNA转染培养的软骨细胞,再用IL-1β刺激诱导软骨细胞,提取蛋白质和RNA.利用RT-PCR和Western blot从mRNA和蛋白质两水平检测NF-κBp65、NOS-2和COX-2的表达,采用凝胶电泳迁移率分析(EMSA)测定NF-κB的活性.结果:NF-κBp65特异性siRNA有效干扰NF-κBp65的表达,降低NF-κB的活性,抑制IL-1β诱导的NOS-2和COX-2的表达.结论:NF-κBp65特异性siRNA可用于关节炎治疗的实验研究.
目的:篩選有效的覈因子-κB(NF-κB)p65特異性小榦擾覈糖覈痠(siRNA),優化反應條件,用來抑製白細胞介素-1β(IL-1β)誘導的軟骨細胞中一氧化氮閤酶-2(NOS-2)和環氧閤酶-2(COX-2)的錶達,探討siRNA技術在關節炎治療方麵的應用.方法:體外轉錄閤成NF-κBp65特異性siRNA,質脂體轉染軟骨細胞,篩選齣有效的siRNA.將篩選的siRNA轉染培養的軟骨細胞,再用IL-1β刺激誘導軟骨細胞,提取蛋白質和RNA.利用RT-PCR和Western blot從mRNA和蛋白質兩水平檢測NF-κBp65、NOS-2和COX-2的錶達,採用凝膠電泳遷移率分析(EMSA)測定NF-κB的活性.結果:NF-κBp65特異性siRNA有效榦擾NF-κBp65的錶達,降低NF-κB的活性,抑製IL-1β誘導的NOS-2和COX-2的錶達.結論:NF-κBp65特異性siRNA可用于關節炎治療的實驗研究.
목적:사선유효적핵인자-κB(NF-κB)p65특이성소간우핵당핵산(siRNA),우화반응조건,용래억제백세포개소-1β(IL-1β)유도적연골세포중일양화담합매-2(NOS-2)화배양합매-2(COX-2)적표체,탐토siRNA기술재관절염치료방면적응용.방법:체외전록합성NF-κBp65특이성siRNA,질지체전염연골세포,사선출유효적siRNA.장사선적siRNA전염배양적연골세포,재용IL-1β자격유도연골세포,제취단백질화RNA.이용RT-PCR화Western blot종mRNA화단백질량수평검측NF-κBp65、NOS-2화COX-2적표체,채용응효전영천이솔분석(EMSA)측정NF-κB적활성.결과:NF-κBp65특이성siRNA유효간우NF-κBp65적표체,강저NF-κB적활성,억제IL-1β유도적NOS-2화COX-2적표체.결론:NF-κBp65특이성siRNA가용우관절염치료적실험연구.
