CAJ | 학술논문

目的: 构建胶质瘤耐替尼泊苷(teniposide,又称VM-26)细胞株,利用基因芯片筛查该细胞株继发性耐药相关基因并证实其表达.方法: 选用人胶质瘤细胞系SHG44为靶细胞,从低剂量起始逐步递增用药量(每4 000个细胞VM-26剂量由0.135 ng至4.5 ng)诱导建立对VM-26耐药的细胞株,绘制亲代细胞系和耐药细胞株增殖曲线比较两者倍增时间,采用细胞毒性实验计算半数抑制浓度(IC50)比较两者耐药程度的差异.应用人类cDNA表达谱芯片检测耐药和敏感细胞基因表达谱的变化,筛查出与耐药有关的基因并经半定量RT-PCR验证.结果: 经过72代诱导培养,建立了稳定耐药的细胞株SHG44/VM-26,耐药性是亲代细胞的52.6倍;耐药细胞倍增时间明显长于亲代细胞(25.6 vs 48.9 h);cDNA芯片筛选出11个基因表达上调,42个基因表达下调;半定量RT-PCR证实基因MDR1、NGFR、HSP22、CX IX、CDKN3和NADE的表达与基因芯片结果基本一致.结论: 成功建立胶质瘤耐替尼泊苷细胞株SHG44/VM-26,该细胞株的继发性耐药与基因MDR1、NGFR、HSP22的高表达和CX IX、CDKN3和NADE的低表达相关.
목적: 구건효질류내체니박감(teniposide,우칭VM-26)세포주,이용기인심편사사해세포주계발성내약상관기인병증실기표체.방법: 선용인효질류세포계SHG44위파세포,종저제량기시축보체증용약량(매4 000개세포VM-26제량유0.135 ng지4.5 ng)유도건립대VM-26내약적세포주,회제친대세포계화내약세포주증식곡선비교량자배증시간,채용세포독성실험계산반수억제농도(IC50)비교량자내약정도적차이.응용인류cDNA표체보심편검측내약화민감세포기인표체보적변화,사사출여내약유관적기인병경반정량RT-PCR험증.결과: 경과72대유도배양,건립료은정내약적세포주SHG44/VM-26,내약성시친대세포적52.6배;내약세포배증시간명현장우친대세포(25.6 vs 48.9 h);cDNA심편사선출11개기인표체상조,42개기인표체하조;반정량RT-PCR증실기인MDR1、NGFR、HSP22、CX IX、CDKN3화NADE적표체여기인심편결과기본일치.결론: 성공건립효질류내체니박감세포주SHG44/VM-26,해세포주적계발성내약여기인MDR1、NGFR、HSP22적고표체화CX IX、CDKN3화NADE적저표체상관.