中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2007年
6期
830-833
,共4页
汪招雄%何启盖%刘军发%刘正飞%陈焕春
汪招雄%何啟蓋%劉軍髮%劉正飛%陳煥春
왕초웅%하계개%류군발%류정비%진환춘
胸膜肺炎放线杆菌%ApxⅢA基因%Pichia pastoris%分泌表达
胸膜肺炎放線桿菌%ApxⅢA基因%Pichia pastoris%分泌錶達
흉막폐염방선간균%ApxⅢA기인%Pichia pastoris%분비표체
应用PCR方法扩增猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinabacillus Pleuropneumoniae,App)编码毒素ⅢA结构蛋白的完整基因,连接到载体pMD18-T中,经Not Ⅰ和Snab Ⅰ双酶切后连接到用同样酶切的表达载体pPIC9k上,转化GS115酵母感受态细胞,经甲醇诱导表达了分泌到胞外的ApxⅢA蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白约为110 000,与预期相符.Dot-blot和ELISA检测结果表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性.为进一步研究Apx Ⅲ A蛋白的结构和功能,研制App重组诊断抗原或亚单位疫苗奠定了基础.
應用PCR方法擴增豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌(Actinabacillus Pleuropneumoniae,App)編碼毒素ⅢA結構蛋白的完整基因,連接到載體pMD18-T中,經Not Ⅰ和Snab Ⅰ雙酶切後連接到用同樣酶切的錶達載體pPIC9k上,轉化GS115酵母感受態細胞,經甲醇誘導錶達瞭分泌到胞外的ApxⅢA蛋白.SDS-PAGE分析顯示,錶達的蛋白約為110 000,與預期相符.Dot-blot和ELISA檢測結果錶明,錶達蛋白具有良好的抗原性和特異性.為進一步研究Apx Ⅲ A蛋白的結構和功能,研製App重組診斷抗原或亞單位疫苗奠定瞭基礎.
응용PCR방법확증저전염성흉막폐염방선간균(Actinabacillus Pleuropneumoniae,App)편마독소ⅢA결구단백적완정기인,련접도재체pMD18-T중,경Not Ⅰ화Snab Ⅰ쌍매절후련접도용동양매절적표체재체pPIC9k상,전화GS115효모감수태세포,경갑순유도표체료분비도포외적ApxⅢA단백.SDS-PAGE분석현시,표체적단백약위110 000,여예기상부.Dot-blot화ELISA검측결과표명,표체단백구유량호적항원성화특이성.위진일보연구Apx Ⅲ A단백적결구화공능,연제App중조진단항원혹아단위역묘전정료기출.
