中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2007年
11期
938-945
,共8页
杨开艳%顾建兰%殷冬梅%沈勤
楊開豔%顧建蘭%慇鼕梅%瀋勤
양개염%고건란%은동매%침근
小胶质细胞%姜黄素%诱导型一氧化氮合酶%氧化应激
小膠質細胞%薑黃素%誘導型一氧化氮閤酶%氧化應激
소효질세포%강황소%유도형일양화담합매%양화응격
用姜黄素预处理小胶质细胞株BV,1 h后加用脂多糖(200 ng/ml)进行刺激,通过MTT检测细胞活性;硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;Western印迹、免疫细胞化学染色检测细胞活化后形态及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达;瞬时转染和荧光素酶报告基因鉴定iNOS和NF-κB基因表达活性;SOD和GSH-Px检测姜黄素的抗氧化能力.结果证明,脂多糖可促使小胶质细胞活化,使iNOS和NF-κB基因表达活性显著增强;iNOS蛋白表达明显上调,NO释放增多;细胞内SOD和GSH-Px活性明显下降.而姜黄素(10 μmol/L)可以显著抑制活化后小胶质细胞NO的产生、iNOS蛋白的表达及iNOS-Luc、NF-κB-Luc的表达活性,其机制可能通过NF-κB的信号转导途径抑制iNOS的表达.姜黄素可通过提高细胞内SOD和GSH-Px的活性发挥抗氧化作用.
用薑黃素預處理小膠質細胞株BV,1 h後加用脂多糖(200 ng/ml)進行刺激,通過MTT檢測細胞活性;硝痠還原酶法檢測細胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;Western印跡、免疫細胞化學染色檢測細胞活化後形態及誘導型一氧化氮閤酶(iNOS)蛋白的錶達;瞬時轉染和熒光素酶報告基因鑒定iNOS和NF-κB基因錶達活性;SOD和GSH-Px檢測薑黃素的抗氧化能力.結果證明,脂多糖可促使小膠質細胞活化,使iNOS和NF-κB基因錶達活性顯著增彊;iNOS蛋白錶達明顯上調,NO釋放增多;細胞內SOD和GSH-Px活性明顯下降.而薑黃素(10 μmol/L)可以顯著抑製活化後小膠質細胞NO的產生、iNOS蛋白的錶達及iNOS-Luc、NF-κB-Luc的錶達活性,其機製可能通過NF-κB的信號轉導途徑抑製iNOS的錶達.薑黃素可通過提高細胞內SOD和GSH-Px的活性髮揮抗氧化作用.
용강황소예처리소효질세포주BV,1 h후가용지다당(200 ng/ml)진행자격,통과MTT검측세포활성;초산환원매법검측세포상청액중일양화담(NO)적함량;Western인적、면역세포화학염색검측세포활화후형태급유도형일양화담합매(iNOS)단백적표체;순시전염화형광소매보고기인감정iNOS화NF-κB기인표체활성;SOD화GSH-Px검측강황소적항양화능력.결과증명,지다당가촉사소효질세포활화,사iNOS화NF-κB기인표체활성현저증강;iNOS단백표체명현상조,NO석방증다;세포내SOD화GSH-Px활성명현하강.이강황소(10 μmol/L)가이현저억제활화후소효질세포NO적산생、iNOS단백적표체급iNOS-Luc、NF-κB-Luc적표체활성,기궤제가능통과NF-κB적신호전도도경억제iNOS적표체.강황소가통과제고세포내SOD화GSH-Px적활성발휘항양화작용.
