临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
臨床耳鼻嚥喉頭頸外科雜誌
림상이비인후두경외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL OTORHINOLARYNGOLOGY HEAD AND NECK SURGERY
2007年
22期
1031-1033
,共3页
李隽%孔维佳%陈敏%周长璐
李雋%孔維佳%陳敏%週長璐
리준%공유가%진민%주장로
耳蜗%血管纹%细胞培养%缘细胞
耳蝸%血管紋%細胞培養%緣細胞
이와%혈관문%세포배양%연세포
目的:建立成年大鼠耳蜗血管纹缘细胞(MC)的体外培养体系.方法:采用活体组织分离及培养技术,获取培养的大鼠耳蜗MC,透射电镜观察细胞超微结构,免疫组织化学法检测上皮细胞标志性中间丝角蛋白的表达及纯度,RT-PCR检测MC特征性的中间丝角蛋白mRNA的表达.结果:体外培养的MC呈不规则多角形,细胞增殖相互连接,紧密排列呈现培养上皮细胞典型的"铺路石"样外观,并可见由数百个MC密集生长组成的折光性强的球形结构(dome);透射电镜观察可见细胞周围有微绒毛样结构;免疫细胞化学检查,纯化后95%以上的MC细胞质呈桔黄色,而对照组无此着色.RT-PCR扩增出标志中间丝角蛋白基因表达的PCR产物,条带位于300～400 bp,与目的条带(368 bp)相符.结论:采用组织块培养技术成功建立成年大鼠耳蜗血管纹MC的体外培养体系,为进一步研究成熟期MC的功能提供合适的细胞模型.
目的:建立成年大鼠耳蝸血管紋緣細胞(MC)的體外培養體繫.方法:採用活體組織分離及培養技術,穫取培養的大鼠耳蝸MC,透射電鏡觀察細胞超微結構,免疫組織化學法檢測上皮細胞標誌性中間絲角蛋白的錶達及純度,RT-PCR檢測MC特徵性的中間絲角蛋白mRNA的錶達.結果:體外培養的MC呈不規則多角形,細胞增殖相互連接,緊密排列呈現培養上皮細胞典型的"鋪路石"樣外觀,併可見由數百箇MC密集生長組成的摺光性彊的毬形結構(dome);透射電鏡觀察可見細胞週圍有微絨毛樣結構;免疫細胞化學檢查,純化後95%以上的MC細胞質呈桔黃色,而對照組無此著色.RT-PCR擴增齣標誌中間絲角蛋白基因錶達的PCR產物,條帶位于300～400 bp,與目的條帶(368 bp)相符.結論:採用組織塊培養技術成功建立成年大鼠耳蝸血管紋MC的體外培養體繫,為進一步研究成熟期MC的功能提供閤適的細胞模型.
목적:건립성년대서이와혈관문연세포(MC)적체외배양체계.방법:채용활체조직분리급배양기술,획취배양적대서이와MC,투사전경관찰세포초미결구,면역조직화학법검측상피세포표지성중간사각단백적표체급순도,RT-PCR검측MC특정성적중간사각단백mRNA적표체.결과:체외배양적MC정불규칙다각형,세포증식상호련접,긴밀배렬정현배양상피세포전형적"포로석"양외관,병가견유수백개MC밀집생장조성적절광성강적구형결구(dome);투사전경관찰가견세포주위유미융모양결구;면역세포화학검사,순화후95%이상적MC세포질정길황색,이대조조무차착색.RT-PCR확증출표지중간사각단백기인표체적PCR산물,조대위우300～400 bp,여목적조대(368 bp)상부.결론:채용조직괴배양기술성공건립성년대서이와혈관문MC적체외배양체계,위진일보연구성숙기MC적공능제공합괄적세포모형.
