微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
6期
1044-1049
,共6页
刘国平%吴斌%林艺远%刘梦元%陈焕春%胡长敏
劉國平%吳斌%林藝遠%劉夢元%陳煥春%鬍長敏
류국평%오빈%림예원%류몽원%진환춘%호장민
Ee株%SLT-IIeB%FedF%融合表达%免疫原性
Ee株%SLT-IIeB%FedF%融閤錶達%免疫原性
Ee주%SLT-IIeB%FedF%융합표체%면역원성
根据猪水肿病大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-IIeB和FedF的基因序列,利用PCR技术克隆目的片段,将SLT-IIeB和FedF基因依序串联于谷胱甘肽-S-转移酶(GST) 表达系统的GST下游,在大肠杆菌中成功获得了大小约为63kDa融合蛋白GST-SF,Western blot 检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性.以纯化的融合蛋白为抗原免疫新西兰兔制备血清,体外活性试验表明,所制备的抗血清能中和Ee株水肿毒素对Vero细胞的病变效应;黏附抑制试验证实抗血清能抑制Ee株对猪小肠刷状缘细胞的黏附.将融合蛋白免疫小鼠,结果表明,GST-SF能够诱发较好的免疫反应,并能提供对Ee株5LD50致死剂量的70%保护率.研究表明GST-SF融合蛋白具有良好的免疫原性,具有良好的应用前景.
根據豬水腫病大腸桿菌Ee株主要免疫原性片段SLT-IIeB和FedF的基因序列,利用PCR技術剋隆目的片段,將SLT-IIeB和FedF基因依序串聯于穀胱甘肽-S-轉移酶(GST) 錶達繫統的GST下遊,在大腸桿菌中成功穫得瞭大小約為63kDa融閤蛋白GST-SF,Western blot 檢測證實錶達的融閤蛋白具有良好的生物學活性.以純化的融閤蛋白為抗原免疫新西蘭兔製備血清,體外活性試驗錶明,所製備的抗血清能中和Ee株水腫毒素對Vero細胞的病變效應;黏附抑製試驗證實抗血清能抑製Ee株對豬小腸刷狀緣細胞的黏附.將融閤蛋白免疫小鼠,結果錶明,GST-SF能夠誘髮較好的免疫反應,併能提供對Ee株5LD50緻死劑量的70%保護率.研究錶明GST-SF融閤蛋白具有良好的免疫原性,具有良好的應用前景.
근거저수종병대장간균Ee주주요면역원성편단SLT-IIeB화FedF적기인서렬,이용PCR기술극륭목적편단,장SLT-IIeB화FedF기인의서천련우곡광감태-S-전이매(GST) 표체계통적GST하유,재대장간균중성공획득료대소약위63kDa융합단백GST-SF,Western blot 검측증실표체적융합단백구유량호적생물학활성.이순화적융합단백위항원면역신서란토제비혈청,체외활성시험표명,소제비적항혈청능중화Ee주수종독소대Vero세포적병변효응;점부억제시험증실항혈청능억제Ee주대저소장쇄상연세포적점부.장융합단백면역소서,결과표명,GST-SF능구유발교호적면역반응,병능제공대Ee주5LD50치사제량적70%보호솔.연구표명GST-SF융합단백구유량호적면역원성,구유량호적응용전경.
