CAJ | 학술논문

目的:探讨以凋亡基因TRAIL为靶基因,腺病毒(Ad)为载体,人端粒酶(TERT)启动子引导的重组基因治疗药物Ad TERT-TRAIL诱导人鳞状细胞癌细胞(TCa8113)凋亡的作用.方法:含有绿色荧光蛋白基因(EGFP)的腺病毒载体(AdTERT-EGFP)转染TCa8113细胞,确定重组腺病毒载体转染效率;AdTERT-EGFP为对照组,AdTERT-TRAIL为实验组感染TCa8113细胞,采用RT-PCR方法检测TRAIL的表达.应用倒置显微镜观察细胞形态,应用MTT检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:AdTERT-EGFP在1000p/cell时转染效率为100%.RT-PCR可检测到594bp的TRAIL基因.细胞转染AdTERT-TRAIL和AdTERT-EGFP后,随时间细胞存活率逐渐下降,但AdTERT-TRAIL组较AdTERT-EGFP组下降更快,统计学分析有显著意义(P＜O.001).AdTERT-TRAIL和AdTERT-EGFP均能诱导TCa8113细胞凋亡,而AdTERT-TRAIL组引起细胞凋亡的程度明显比AdTERT-EGFP组大,统计学有显著差异(P＜O.0001).结论:AdTERT-TRAIL在体外能明显抑制TCa8113细胞的活性,并能促进其凋亡.
목적:탐토이조망기인TRAIL위파기인,선병독(Ad)위재체,인단립매(TERT)계동자인도적중조기인치료약물Ad TERT-TRAIL유도인린상세포암세포(TCa8113)조망적작용.방법:함유록색형광단백기인(EGFP)적선병독재체(AdTERT-EGFP)전염TCa8113세포,학정중조선병독재체전염효솔;AdTERT-EGFP위대조조,AdTERT-TRAIL위실험조감염TCa8113세포,채용RT-PCR방법검측TRAIL적표체.응용도치현미경관찰세포형태,응용MTT검측세포적존활솔,류식세포의검측세포조망솔.결과:AdTERT-EGFP재1000p/cell시전염효솔위100%.RT-PCR가검측도594bp적TRAIL기인.세포전염AdTERT-TRAIL화AdTERT-EGFP후,수시간세포존활솔축점하강,단AdTERT-TRAIL조교AdTERT-EGFP조하강경쾌,통계학분석유현저의의(P＜O.001).AdTERT-TRAIL화AdTERT-EGFP균능유도TCa8113세포조망,이AdTERT-TRAIL조인기세포조망적정도명현비AdTERT-EGFP조대,통계학유현저차이(P＜O.0001).결론:AdTERT-TRAIL재체외능명현억제TCa8113세포적활성,병능촉진기조망.