氨基酸和生物资源
氨基痠和生物資源
안기산화생물자원
AMINO ACIDS AND BIOTIC RESOURCES
2007年
3期
26-29
,共4页
马云%何淑雅%喻长顺%苏娇%张晋%王茹静%胡维新
馬雲%何淑雅%喻長順%囌嬌%張晉%王茹靜%鬍維新
마운%하숙아%유장순%소교%장진%왕여정%호유신
酵母三杂交%FXR1P%IQCE%脆性X综合征%RNA-蛋白质相互作用
酵母三雜交%FXR1P%IQCE%脆性X綜閤徵%RNA-蛋白質相互作用
효모삼잡교%FXR1P%IQCE%취성X종합정%RNA-단백질상호작용
脆性X相关基因1编码蛋白FXR1P是一种RNA结合蛋白,其所结合的靶RNA目前所知甚少.本研究应用酵母三杂交技术对本课题组从pRH3-cDNA人脑海马RNA表达文库中筛选到的一种可能与FXR1P存在相互作用的RNA IQCE进行研究,以验证该RNA与FXR1P的相互作用.方法为:提取利用酵母三杂交技术初步筛选得到的酵母阳性克隆的质粒,转化大肠杆菌Top10,利用其质粒不相容性分离插入了目的片段的pRH3'-cDNA质粒,将该质粒转化入含目的基因FXR1的酵母菌株L40-ura3/pHyblex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,进行一对一的酵母三杂交验证,最后将该片段进行测序.测序结果为IQCE的一段编码序列,而目前尚无研究报导FXR1与IQCE的相互关系.结论:提示FXR1P与IQCE mRNA存在相互作用,IQCE可能是FXR1P发育调控网络组成成员之一.
脆性X相關基因1編碼蛋白FXR1P是一種RNA結閤蛋白,其所結閤的靶RNA目前所知甚少.本研究應用酵母三雜交技術對本課題組從pRH3-cDNA人腦海馬RNA錶達文庫中篩選到的一種可能與FXR1P存在相互作用的RNA IQCE進行研究,以驗證該RNA與FXR1P的相互作用.方法為:提取利用酵母三雜交技術初步篩選得到的酵母暘性剋隆的質粒,轉化大腸桿菌Top10,利用其質粒不相容性分離插入瞭目的片段的pRH3'-cDNA質粒,將該質粒轉化入含目的基因FXR1的酵母菌株L40-ura3/pHyblex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,進行一對一的酵母三雜交驗證,最後將該片段進行測序.測序結果為IQCE的一段編碼序列,而目前尚無研究報導FXR1與IQCE的相互關繫.結論:提示FXR1P與IQCE mRNA存在相互作用,IQCE可能是FXR1P髮育調控網絡組成成員之一.
취성X상관기인1편마단백FXR1P시일충RNA결합단백,기소결합적파RNA목전소지심소.본연구응용효모삼잡교기술대본과제조종pRH3-cDNA인뇌해마RNA표체문고중사선도적일충가능여FXR1P존재상호작용적RNA IQCE진행연구,이험증해RNA여FXR1P적상호작용.방법위:제취이용효모삼잡교기술초보사선득도적효모양성극륭적질립,전화대장간균Top10,이용기질립불상용성분리삽입료목적편단적pRH3'-cDNA질립,장해질립전화입함목적기인FXR1적효모균주L40-ura3/pHyblex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,진행일대일적효모삼잡교험증,최후장해편단진행측서.측서결과위IQCE적일단편마서렬,이목전상무연구보도FXR1여IQCE적상호관계.결론:제시FXR1P여IQCE mRNA존재상호작용,IQCE가능시FXR1P발육조공망락조성성원지일.
