西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
8期
175-179
,共5页
表皮生长因子%pGEX-4T-1%BL21-CodonPlusTM-RP%分离纯化%生物学活性
錶皮生長因子%pGEX-4T-1%BL21-CodonPlusTM-RP%分離純化%生物學活性
표피생장인자%pGEX-4T-1%BL21-CodonPlusTM-RP%분리순화%생물학활성
为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子(hEGF),将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pGEX-4t-1(+)-hEGF转化入BL21-CodonPlusTM-RP表达宿主菌进行大量表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在.收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过Glutathione SepharoseTM 4B纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白.以兔抗人EGF单克隆抗体为一抗,进行Western blotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hEGF.最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hEGF生物学活性.
為瞭得到具有生物學活性的人錶皮生長因子(hEGF),將含有人錶皮生長因子基因的原覈錶達載體pGEX-4t-1(+)-hEGF轉化入BL21-CodonPlusTM-RP錶達宿主菌進行大量錶達,SDS-PAGE分析錶明,融閤蛋白主要以包涵體的形式存在.收集包涵體,用氧化複性的方法,加入還原型的穀胱甘肽進行複性,之後通過Glutathione SepharoseTM 4B純化柱,分離純化得到複性的融閤蛋白.以兔抗人EGF單剋隆抗體為一抗,進行Western blotting鑒定,證明分離純化得到的融閤蛋白含有目的蛋白hEGF.最後對複性的融閤蛋白進行瞭活性分析,錶明該融閤蛋白具有良好的hEGF生物學活性.
위료득도구유생물학활성적인표피생장인자(hEGF),장함유인표피생장인자기인적원핵표체재체pGEX-4t-1(+)-hEGF전화입BL21-CodonPlusTM-RP표체숙주균진행대량표체,SDS-PAGE분석표명,융합단백주요이포함체적형식존재.수집포함체,용양화복성적방법,가입환원형적곡광감태진행복성,지후통과Glutathione SepharoseTM 4B순화주,분리순화득도복성적융합단백.이토항인EGF단극륭항체위일항,진행Western blotting감정,증명분리순화득도적융합단백함유목적단백hEGF.최후대복성적융합단백진행료활성분석,표명해융합단백구유량호적hEGF생물학활성.
