南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2007年
1期
23-26
,共4页
徐闻欢%徐娟%王迎伟%陈霞%高玲娟%吴宜琴
徐聞歡%徐娟%王迎偉%陳霞%高玲娟%吳宜琴
서문환%서연%왕영위%진하%고령연%오의금
结核杆菌%ESAT-6%FL
結覈桿菌%ESAT-6%FL
결핵간균%ESAT-6%FL
目的:构建可同时表达flt3配体(flt3-ligand,FL)和结核杆菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重组pIRES质粒,并在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中表达,为进一步研究结核杆菌DNA疫苗提供实验基础.方法:采用PCR方法将FL和ESAT-6基因分别定向克隆入真核双表达载体pIRES.在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至GMC细胞,Western blot鉴定其体外表达.结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,该重组质粒在体外GMC细胞中能表达FL和ESAT-6两种蛋白.结论:成功构建了结核杆菌FL和ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达.
目的:構建可同時錶達flt3配體(flt3-ligand,FL)和結覈桿菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重組pIRES質粒,併在大鼠腎小毬繫膜細胞(GMC)中錶達,為進一步研究結覈桿菌DNA疫苗提供實驗基礎.方法:採用PCR方法將FL和ESAT-6基因分彆定嚮剋隆入真覈雙錶達載體pIRES.在酶切分析及序列測定後,用脂質體轉染至GMC細胞,Western blot鑒定其體外錶達.結果:覈痠序列測定證實重組質粒構建正確,該重組質粒在體外GMC細胞中能錶達FL和ESAT-6兩種蛋白.結論:成功構建瞭結覈桿菌FL和ESAT-6雙順反子真覈錶達質粒,併在體外實現瞭共錶達.
목적:구건가동시표체flt3배체(flt3-ligand,FL)화결핵간균6kD조기분비단백(ESAT-6)적중조pIRES질립,병재대서신소구계막세포(GMC)중표체,위진일보연구결핵간균DNA역묘제공실험기출.방법:채용PCR방법장FL화ESAT-6기인분별정향극륭입진핵쌍표체재체pIRES.재매절분석급서렬측정후,용지질체전염지GMC세포,Western blot감정기체외표체.결과:핵산서렬측정증실중조질립구건정학,해중조질립재체외GMC세포중능표체FL화ESAT-6량충단백.결론:성공구건료결핵간균FL화ESAT-6쌍순반자진핵표체질립,병재체외실현료공표체.
