重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2006年
18期
1663-1665
,共3页
沈大斌%龚小云%顾涛%罗福康%郑红
瀋大斌%龔小雲%顧濤%囉福康%鄭紅
침대빈%공소운%고도%라복강%정홍
人趋化因子受体6%pcDNA3.1(+)%趋化实验%钙流实验%克隆
人趨化因子受體6%pcDNA3.1(+)%趨化實驗%鈣流實驗%剋隆
인추화인자수체6%pcDNA3.1(+)%추화실험%개류실험%극륭
目的 构建人趋化因子受体6(CCR6)cDNA序列的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达,为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础.方法 采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DNA片段,并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;将该质粒pcDNA3.1(+)-CCR6转染HEK293细胞,用流式细胞术检测转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞;采用体外趋化实验、钙流实验,验证转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞表面表达的CCR6的生物学活性.结果 经RT-PCR获得了编码人CCR6受体的DNA片段,构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;转染HEK293细胞,经流式细胞仪检测、趋化实验、钙流实验证实,表达CCR6的HEK293细胞具有趋化因子受体CCR6的生物学活性.结论 重组人趋化因子受体CCR6克隆成功,并在HEK293细胞中获得了表达,为研究CCR6的生物学功能及筛选CCR6拮抗剂奠定了基础.
目的 構建人趨化因子受體6(CCR6)cDNA序列的真覈錶達載體,併在HEK293細胞中錶達,為研究CCR6生物學功能和篩選CCR6拮抗劑奠定基礎.方法 採用RT-PCR方法從人扁桃體剋隆CCR6受體的DNA片段,併將該片段插入真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)中,構建重組真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)-CCR6;將該質粒pcDNA3.1(+)-CCR6轉染HEK293細胞,用流式細胞術檢測轉染pcDNA3.1(+)-CCR6質粒的HEK293細胞;採用體外趨化實驗、鈣流實驗,驗證轉染pcDNA3.1(+)-CCR6質粒的HEK293細胞錶麵錶達的CCR6的生物學活性.結果 經RT-PCR穫得瞭編碼人CCR6受體的DNA片段,構建瞭重組真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)-CCR6;轉染HEK293細胞,經流式細胞儀檢測、趨化實驗、鈣流實驗證實,錶達CCR6的HEK293細胞具有趨化因子受體CCR6的生物學活性.結論 重組人趨化因子受體CCR6剋隆成功,併在HEK293細胞中穫得瞭錶達,為研究CCR6的生物學功能及篩選CCR6拮抗劑奠定瞭基礎.
목적 구건인추화인자수체6(CCR6)cDNA서렬적진핵표체재체,병재HEK293세포중표체,위연구CCR6생물학공능화사선CCR6길항제전정기출.방법 채용RT-PCR방법종인편도체극륭CCR6수체적DNA편단,병장해편단삽입진핵표체질립pcDNA3.1(+)중,구건중조진핵표체질립pcDNA3.1(+)-CCR6;장해질립pcDNA3.1(+)-CCR6전염HEK293세포,용류식세포술검측전염pcDNA3.1(+)-CCR6질립적HEK293세포;채용체외추화실험、개류실험,험증전염pcDNA3.1(+)-CCR6질립적HEK293세포표면표체적CCR6적생물학활성.결과 경RT-PCR획득료편마인CCR6수체적DNA편단,구건료중조진핵표체질립pcDNA3.1(+)-CCR6;전염HEK293세포,경류식세포의검측、추화실험、개류실험증실,표체CCR6적HEK293세포구유추화인자수체CCR6적생물학활성.결론 중조인추화인자수체CCR6극륭성공,병재HEK293세포중획득료표체,위연구CCR6적생물학공능급사선CCR6길항제전정료기출.
