中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2006年
5期
485-489
,共5页
万超%温国元%潘兹书%张楚瑜%熊中良%杨峻%艾地云
萬超%溫國元%潘玆書%張楚瑜%熊中良%楊峻%艾地雲
만초%온국원%반자서%장초유%웅중량%양준%애지운
伪狂犬病毒%荧光定量PCR%定量检测
偽狂犬病毒%熒光定量PCR%定量檢測
위광견병독%형광정량PCR%정량검측
以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术.该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍.检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染.应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66).与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量检测和肉类食品进出口检疫.
以偽狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列為參攷,設計、優化齣一對特異的PCR引物和一條TaqMan熒光探針,結閤RotorGene檢測繫統,建立一種快速定量檢測偽狂犬病毒的熒光定量PCR技術.該方法線形範圍為1.0×102-1.0×107拷貝/μL,靈敏度達102拷貝/μLDNA,比常規PCR高10倍.檢測的特異性明顯高于常規PCR,同時避免瞭常規PCR因電泳造成的汙染.應用該技術檢測66例豬組織或鼻嚥拭子樣品,暘性42份,暘性檢齣率為63.6%(42/66).與病毒分離培養、常規PCR相比較結果顯示,該方法具有快速、靈敏、特異、重複性好和能定量檢測等優點,該方法可用于豬場PRV感染的快速定量檢測和肉類食品進齣口檢疫.
이위광견병독(PRV)보수적gE기인서렬위삼고,설계、우화출일대특이적PCR인물화일조TaqMan형광탐침,결합RotorGene검측계통,건립일충쾌속정량검측위광견병독적형광정량PCR기술.해방법선형범위위1.0×102-1.0×107고패/μL,령민도체102고패/μLDNA,비상규PCR고10배.검측적특이성명현고우상규PCR,동시피면료상규PCR인전영조성적오염.응용해기술검측66례저조직혹비인식자양품,양성42빈,양성검출솔위63.6%(42/66).여병독분리배양、상규PCR상비교결과현시,해방법구유쾌속、령민、특이、중복성호화능정량검측등우점,해방법가용우저장PRV감염적쾌속정량검측화육류식품진출구검역.
