山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2006年
4期
367-372
,共6页
马建民%赵家良%陈钢炜%卞爱琳%张华
馬建民%趙傢良%陳鋼煒%卞愛琳%張華
마건민%조가량%진강위%변애림%장화
大鼠%Tenon's囊成纤维细胞%细胞培养%鉴定%细胞生长曲线
大鼠%Tenon's囊成纖維細胞%細胞培養%鑒定%細胞生長麯線
대서%Tenon's낭성섬유세포%세포배양%감정%세포생장곡선
目的探讨建立体外大鼠Tenon's囊成纤维细胞的培养方法,并对体外培养的Tenon's囊成纤维细胞的生长特性进行观察.方法选用健康年幼的SD大鼠40只,采用断颈法将其处死,摘除眼球,无菌条件下,分离剪下Tenon's囊组织,采用植块法对Tenon's囊成纤维细胞进行体外培养;通过细胞形态学观察和细胞免疫组化染色技术对其细胞性质进行鉴定;通过细胞记数和MTT法对其生长特性进行研究.结果原代培养的大鼠Tenon's囊组织块接种后,约48 h即可见细胞由组织块中爬出,培养8~10 d,细胞汇合程度大约可达70%左右;培养14-16 d,细胞完全汇合;在细胞汇合程度达到70%-80%时,可以进行细胞传代,传代细胞接种后4-5 h大部分细胞贴壁,10-12 d左右传代细胞完全汇合.光镜下观察,可见Tenon's囊成纤维细胞,在汇合程度低时细胞呈细长梭形外观,汇合程度高时细胞可呈多边形改变.免疫组化染色可见Tenon's囊成纤维细胞角蛋白染色阴性,波蛋白染色阳性.细胞生长曲线显示,在2-8 d细胞处于对数生长期.结论体外成功地培养了大鼠Tenon's囊成纤维细胞,这不仅为青光眼滤过泡瘢痕化防治的基础研究提供了一种新的细胞来源,同时为抗结膜瘢痕化药物的研究和开发提供了一种新的简便实用的细胞来源途径.
目的探討建立體外大鼠Tenon's囊成纖維細胞的培養方法,併對體外培養的Tenon's囊成纖維細胞的生長特性進行觀察.方法選用健康年幼的SD大鼠40隻,採用斷頸法將其處死,摘除眼毬,無菌條件下,分離剪下Tenon's囊組織,採用植塊法對Tenon's囊成纖維細胞進行體外培養;通過細胞形態學觀察和細胞免疫組化染色技術對其細胞性質進行鑒定;通過細胞記數和MTT法對其生長特性進行研究.結果原代培養的大鼠Tenon's囊組織塊接種後,約48 h即可見細胞由組織塊中爬齣,培養8~10 d,細胞彙閤程度大約可達70%左右;培養14-16 d,細胞完全彙閤;在細胞彙閤程度達到70%-80%時,可以進行細胞傳代,傳代細胞接種後4-5 h大部分細胞貼壁,10-12 d左右傳代細胞完全彙閤.光鏡下觀察,可見Tenon's囊成纖維細胞,在彙閤程度低時細胞呈細長梭形外觀,彙閤程度高時細胞可呈多邊形改變.免疫組化染色可見Tenon's囊成纖維細胞角蛋白染色陰性,波蛋白染色暘性.細胞生長麯線顯示,在2-8 d細胞處于對數生長期.結論體外成功地培養瞭大鼠Tenon's囊成纖維細胞,這不僅為青光眼濾過泡瘢痕化防治的基礎研究提供瞭一種新的細胞來源,同時為抗結膜瘢痕化藥物的研究和開髮提供瞭一種新的簡便實用的細胞來源途徑.
목적탐토건입체외대서Tenon's낭성섬유세포적배양방법,병대체외배양적Tenon's낭성섬유세포적생장특성진행관찰.방법선용건강년유적SD대서40지,채용단경법장기처사,적제안구,무균조건하,분리전하Tenon's낭조직,채용식괴법대Tenon's낭성섬유세포진행체외배양;통과세포형태학관찰화세포면역조화염색기술대기세포성질진행감정;통과세포기수화MTT법대기생장특성진행연구.결과원대배양적대서Tenon's낭조직괴접충후,약48 h즉가견세포유조직괴중파출,배양8~10 d,세포회합정도대약가체70%좌우;배양14-16 d,세포완전회합;재세포회합정도체도70%-80%시,가이진행세포전대,전대세포접충후4-5 h대부분세포첩벽,10-12 d좌우전대세포완전회합.광경하관찰,가견Tenon's낭성섬유세포,재회합정도저시세포정세장사형외관,회합정도고시세포가정다변형개변.면역조화염색가견Tenon's낭성섬유세포각단백염색음성,파단백염색양성.세포생장곡선현시,재2-8 d세포처우대수생장기.결론체외성공지배양료대서Tenon's낭성섬유세포,저불부위청광안려과포반흔화방치적기출연구제공료일충신적세포래원,동시위항결막반흔화약물적연구화개발제공료일충신적간편실용적세포래원도경.