中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
2期
146-149
,共4页
刘毅%韩金祥%邵金辉%朱波%朱有名
劉毅%韓金祥%邵金輝%硃波%硃有名
류의%한금상%소금휘%주파%주유명
单纯疱疹病毒Ⅰ型%包膜糖蛋白G%毕赤酵母
單純皰疹病毒Ⅰ型%包膜糖蛋白G%畢赤酵母
단순포진병독Ⅰ형%포막당단백G%필적효모
目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒型特异性包膜糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体,并进行序列分析.方法PCR扩增HSV-1-gG基因的膜外区,克隆于pGEM-T载体,转化DH5α,提取质粒酶切鉴定后,与pPIC9K载体连接,转化DH5α,筛选阳性克隆,鉴定后转化GS115菌,构建酵母表达载体.对克隆的序列进行分析,预测表达产物的理化特性、抗原性及表达形式.结果获得的重组酵母表达载体pPIC9K-gG,测序结果证实为HSV-1-gG基因,序列分析其高度保守,预测蛋白相对分子质量15 870,等电点pI为4.72,包含全部膜外区分值达1.7的6个强抗原决定簇,将以可溶性形式分泌表达于胞外.结论已成功构建HSV-1 stocker株糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体.
目的構建Ⅰ型單純皰疹病毒型特異性包膜糖蛋白G基因膜外區畢赤酵母錶達載體,併進行序列分析.方法PCR擴增HSV-1-gG基因的膜外區,剋隆于pGEM-T載體,轉化DH5α,提取質粒酶切鑒定後,與pPIC9K載體連接,轉化DH5α,篩選暘性剋隆,鑒定後轉化GS115菌,構建酵母錶達載體.對剋隆的序列進行分析,預測錶達產物的理化特性、抗原性及錶達形式.結果穫得的重組酵母錶達載體pPIC9K-gG,測序結果證實為HSV-1-gG基因,序列分析其高度保守,預測蛋白相對分子質量15 870,等電點pI為4.72,包含全部膜外區分值達1.7的6箇彊抗原決定簇,將以可溶性形式分泌錶達于胞外.結論已成功構建HSV-1 stocker株糖蛋白G基因膜外區畢赤酵母錶達載體.
목적구건Ⅰ형단순포진병독형특이성포막당단백G기인막외구필적효모표체재체,병진행서렬분석.방법PCR확증HSV-1-gG기인적막외구,극륭우pGEM-T재체,전화DH5α,제취질립매절감정후,여pPIC9K재체련접,전화DH5α,사선양성극륭,감정후전화GS115균,구건효모표체재체.대극륭적서렬진행분석,예측표체산물적이화특성、항원성급표체형식.결과획득적중조효모표체재체pPIC9K-gG,측서결과증실위HSV-1-gG기인,서렬분석기고도보수,예측단백상대분자질량15 870,등전점pI위4.72,포함전부막외구분치체1.7적6개강항원결정족,장이가용성형식분비표체우포외.결론이성공구건HSV-1 stocker주당단백G기인막외구필적효모표체재체.
