昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2006年
2期
167-171
,共5页
王云%叶向群%吴亦亮%桂慕燕%左正宏
王雲%葉嚮群%吳亦亮%桂慕燕%左正宏
왕운%협향군%오역량%계모연%좌정굉
家蚕%启动子%RFP报告基因%瞬时表达活性%脂质体介导法
傢蠶%啟動子%RFP報告基因%瞬時錶達活性%脂質體介導法
가잠%계동자%RFP보고기인%순시표체활성%지질체개도법
以红色荧光蛋白基因(RFP)为报告基因,构建含4种不同启动子的重组表达质粒,用脂质体介导法转染家蚕Bombyx mori细胞(Bm-e-HNU5),观察家蚕细胞质肌动蛋白4基因启动子(A4)、α微管蛋白基因启动子(α-tub)、蚕丝心蛋白重链基因启动子(Fib)和家蚕核型多角体病毒早期即刻蛋白基因启动子(IE)4种启动子调控RFP报告基因在家蚕细胞内的瞬时表达情况.构建的重组表达质粒pDsRed-α-tub、pDsRed-A4、pDsRed-IE和pDsRed-Fib经双酶切和PCR鉴定正确无误.转染和转录实验结果表明,除了pDsRed-A4外,其他3种重组质粒在Bm-e-HNU5细胞中都得到高转染率,α-tub、IE和Fib可依次增强RFP报告基因在家蚕细胞内的瞬时表达活性.
以紅色熒光蛋白基因(RFP)為報告基因,構建含4種不同啟動子的重組錶達質粒,用脂質體介導法轉染傢蠶Bombyx mori細胞(Bm-e-HNU5),觀察傢蠶細胞質肌動蛋白4基因啟動子(A4)、α微管蛋白基因啟動子(α-tub)、蠶絲心蛋白重鏈基因啟動子(Fib)和傢蠶覈型多角體病毒早期即刻蛋白基因啟動子(IE)4種啟動子調控RFP報告基因在傢蠶細胞內的瞬時錶達情況.構建的重組錶達質粒pDsRed-α-tub、pDsRed-A4、pDsRed-IE和pDsRed-Fib經雙酶切和PCR鑒定正確無誤.轉染和轉錄實驗結果錶明,除瞭pDsRed-A4外,其他3種重組質粒在Bm-e-HNU5細胞中都得到高轉染率,α-tub、IE和Fib可依次增彊RFP報告基因在傢蠶細胞內的瞬時錶達活性.
이홍색형광단백기인(RFP)위보고기인,구건함4충불동계동자적중조표체질립,용지질체개도법전염가잠Bombyx mori세포(Bm-e-HNU5),관찰가잠세포질기동단백4기인계동자(A4)、α미관단백기인계동자(α-tub)、잠사심단백중련기인계동자(Fib)화가잠핵형다각체병독조기즉각단백기인계동자(IE)4충계동자조공RFP보고기인재가잠세포내적순시표체정황.구건적중조표체질립pDsRed-α-tub、pDsRed-A4、pDsRed-IE화pDsRed-Fib경쌍매절화PCR감정정학무오.전염화전록실험결과표명,제료pDsRed-A4외,기타3충중조질립재Bm-e-HNU5세포중도득도고전염솔,α-tub、IE화Fib가의차증강RFP보고기인재가잠세포내적순시표체활성.