广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2006年
2期
107-110,124
,共5页
冯震%单振菊%周根%邓晓玲
馮震%單振菊%週根%鄧曉玲
풍진%단진국%주근%산효령
沙田柚%黄龙病%16S%rDNA%克隆%序列分析
沙田柚%黃龍病%16S%rDNA%剋隆%序列分析
사전유%황룡병%16S%rDNA%극륭%서렬분석
采集田间表现斑驳症状的沙田柚叶脉,用CTAB法提取总DNA.根据柑橘黄龙病病原16S rDNA的核苷酸序列设计引物P1/P2,进行PCR扩增,获得1条大小为1 167 bp的片段.酶切分析显示,该片段可被切成大小分别约为640 bp和520 bp的2个片段.扩增产物经纯化,与pMD18-T Vector连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH 5α,筛选克隆重组子.对PCR产物进行测序及序列分析,结果表明,与柑橘黄龙病病原亚洲种16S rDNA的同源性为99%,与非洲种的同源性为97%,与美洲种的同源性为96%.认为,沙田柚的斑驳症状是由黄龙病病原引致的,称之为沙田柚黄龙病.该沙田柚黄龙病病原属于柑橘黄龙病病原亚洲种(Liberobacter asiaticus)中的一个成员.系统进化树分析显示,沙田柚黄龙病病原与中国柑橘黄龙病病原亲缘关系最近,推测是直接来自中国柑橘黄龙病病原.
採集田間錶現斑駁癥狀的沙田柚葉脈,用CTAB法提取總DNA.根據柑橘黃龍病病原16S rDNA的覈苷痠序列設計引物P1/P2,進行PCR擴增,穫得1條大小為1 167 bp的片段.酶切分析顯示,該片段可被切成大小分彆約為640 bp和520 bp的2箇片段.擴增產物經純化,與pMD18-T Vector連接,轉化大腸桿菌(Escherichia coli)DH 5α,篩選剋隆重組子.對PCR產物進行測序及序列分析,結果錶明,與柑橘黃龍病病原亞洲種16S rDNA的同源性為99%,與非洲種的同源性為97%,與美洲種的同源性為96%.認為,沙田柚的斑駁癥狀是由黃龍病病原引緻的,稱之為沙田柚黃龍病.該沙田柚黃龍病病原屬于柑橘黃龍病病原亞洲種(Liberobacter asiaticus)中的一箇成員.繫統進化樹分析顯示,沙田柚黃龍病病原與中國柑橘黃龍病病原親緣關繫最近,推測是直接來自中國柑橘黃龍病病原.
채집전간표현반박증상적사전유협맥,용CTAB법제취총DNA.근거감귤황룡병병원16S rDNA적핵감산서렬설계인물P1/P2,진행PCR확증,획득1조대소위1 167 bp적편단.매절분석현시,해편단가피절성대소분별약위640 bp화520 bp적2개편단.확증산물경순화,여pMD18-T Vector련접,전화대장간균(Escherichia coli)DH 5α,사선극륭중조자.대PCR산물진행측서급서렬분석,결과표명,여감귤황룡병병원아주충16S rDNA적동원성위99%,여비주충적동원성위97%,여미주충적동원성위96%.인위,사전유적반박증상시유황룡병병원인치적,칭지위사전유황룡병.해사전유황룡병병원속우감귤황룡병병원아주충(Liberobacter asiaticus)중적일개성원.계통진화수분석현시,사전유황룡병병원여중국감귤황룡병병원친연관계최근,추측시직접래자중국감귤황룡병병원.