南京工业大学学报（自然科学版）
南京工業大學學報（自然科學版）
남경공업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NANJING UNIVERSITY OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
6期
21-26
,共6页
马哲%姚忠%竺凯%徐晓滢%韦萍
馬哲%姚忠%竺凱%徐曉瀅%韋萍
마철%요충%축개%서효형%위평
海因酶%固定化%载体%最优条件
海因酶%固定化%載體%最優條件
해인매%고정화%재체%최우조건
海因酶是利用海因酶法制备手性氨基酸的关键酶.采用Eupergit C、Eupergit C250L及其氨基化后的载体作为固定化介质,对酶液pH值、蛋白浓度、固定化时间以及EDC用量等参数对海因酶固定化过程的影响进行研究,并在实验范围内,得到了上述参数的最优值.研究表明,环氧基载体的最适固定化条件为:酶液pH值为7.0,酶液蛋白质量浓度为0.4mg/mL,固定化时间为20 h;氨基载体最适固定化条件为:酶液pH值为8.0,酶液蛋白质量浓度为0.4 mg/mL,固定化时间为10 h,EDC用量:Eupergit C(-NH2)为70μL,Eupergit C250L(-NH2)为120μL.其中以Eupergit C250L为固定化载体,海因酶的活性回收率可高达87%,且固定化酶的稳定性也较好,酶活半衰期长达2 500h左右,具有较好的稳定性.
海因酶是利用海因酶法製備手性氨基痠的關鍵酶.採用Eupergit C、Eupergit C250L及其氨基化後的載體作為固定化介質,對酶液pH值、蛋白濃度、固定化時間以及EDC用量等參數對海因酶固定化過程的影響進行研究,併在實驗範圍內,得到瞭上述參數的最優值.研究錶明,環氧基載體的最適固定化條件為:酶液pH值為7.0,酶液蛋白質量濃度為0.4mg/mL,固定化時間為20 h;氨基載體最適固定化條件為:酶液pH值為8.0,酶液蛋白質量濃度為0.4 mg/mL,固定化時間為10 h,EDC用量:Eupergit C(-NH2)為70μL,Eupergit C250L(-NH2)為120μL.其中以Eupergit C250L為固定化載體,海因酶的活性迴收率可高達87%,且固定化酶的穩定性也較好,酶活半衰期長達2 500h左右,具有較好的穩定性.
해인매시이용해인매법제비수성안기산적관건매.채용Eupergit C、Eupergit C250L급기안기화후적재체작위고정화개질,대매액pH치、단백농도、고정화시간이급EDC용량등삼수대해인매고정화과정적영향진행연구,병재실험범위내,득도료상술삼수적최우치.연구표명,배양기재체적최괄고정화조건위:매액pH치위7.0,매액단백질량농도위0.4mg/mL,고정화시간위20 h;안기재체최괄고정화조건위:매액pH치위8.0,매액단백질량농도위0.4 mg/mL,고정화시간위10 h,EDC용량:Eupergit C(-NH2)위70μL,Eupergit C250L(-NH2)위120μL.기중이Eupergit C250L위고정화재체,해인매적활성회수솔가고체87%,차고정화매적은정성야교호,매활반쇠기장체2 500h좌우,구유교호적은정성.
