CAJ | 학술논문

为研究环孢霉素A(cyclosporin A,CsA)对缺氧/复氧诱导人脐静脉内皮细胞(ECV-304)与中性粒细胞粘附的影响,本工作以缺氧/复氧诱导粘附为模型,采用β-N-乙酰氨基己糖苷酶比色法检测粘附率,流式细胞术检测ECV-304细胞表面粘附分子E-选择素(E-selectin)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达,Fenton反应测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,West-em-blot法检测ECV-304细胞亲环素A(cyclophilinA,CyPA)、磷酸化及总细胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白的表达.结果发现,ECV-304细胞经缺氧/复氧处理后,ROS释放增多,E-selectin、ICAM-1的表达上调,其表面中性粒细胞的粘附增加,CsA能显著抑制缺氧/复氧的上述作用.缺氧/复氧后,CyPA蛋白表达明显上调,ERK1/2显著活化,细胞总ERK1/2蛋白表达无明显改变.CyPA抑制剂CsA以及CyPA反义寡核苷酸均明显减轻缺氧/复氧诱导的ERK1/2激活,显著减少ECV-304细胞与中性粒细胞粘附.ERK1/2信号通路特异性阻断剂PD98059亦显著抑制ECV-304细胞与中性粒细胞的粘附.上述结果提示,CsA抑制缺氧/复氧诱导的ECV-304细胞与中性粒细胞粘附,并可能通过抑制ROS-Cyclophilin A-ERK1/2的信号转导途径实现.
위연구배포매소A(cyclosporin A,CsA)대결양/복양유도인제정맥내피세포(ECV-304)여중성립세포점부적영향,본공작이결양/복양유도점부위모형,채용β-N-을선안기기당감매비색법검측점부솔,류식세포술검측ECV-304세포표면점부분자E-선택소(E-selectin)、세포간점부분자-1(ICAM-1)적표체,Fenton반응측정활성양(reactive oxygen species,ROS)적함량,West-em-blot법검측ECV-304세포친배소A(cyclophilinA,CyPA)、린산화급총세포외신호조절격매(ERK1/2)단백적표체.결과발현,ECV-304세포경결양/복양처리후,ROS석방증다,E-selectin、ICAM-1적표체상조,기표면중성립세포적점부증가,CsA능현저억제결양/복양적상술작용.결양/복양후,CyPA단백표체명현상조,ERK1/2현저활화,세포총ERK1/2단백표체무명현개변.CyPA억제제CsA이급CyPA반의과핵감산균명현감경결양/복양유도적ERK1/2격활,현저감소ECV-304세포여중성립세포점부.ERK1/2신호통로특이성조단제PD98059역현저억제ECV-304세포여중성립세포적점부.상술결과제시,CsA억제결양/복양유도적ECV-304세포여중성립세포점부,병가능통과억제ROS-Cyclophilin A-ERK1/2적신호전도도경실현.