第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2003年
7期
600-602
,共3页
万琪%孙文萍%苏明权%俞英欣%李力%张瑞国%郭以川
萬琪%孫文萍%囌明權%俞英訢%李力%張瑞國%郭以川
만기%손문평%소명권%유영흔%리력%장서국%곽이천
甲基四氢叶酸还原酶%克隆%原核表达
甲基四氫葉痠還原酶%剋隆%原覈錶達
갑기사경협산환원매%극륭%원핵표체
目的: 克隆人5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)N端部分编码基因,构建重组表达载体并对其诱导表达. 方法: 通过RT-PCR方法扩增出人胎肝组织MTHFR的N端部分1116 bp的核苷酸序列,克隆于载体pGEM-T easy,测序分析后亚克隆于表达载体pGEX-4T-2,构建重组表达载体pGEX- MTHFR(N). 结果: 经过转化E.coli JM109和BL21后,诱导表达出Mr为66×103的蛋白. SDS-PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的31%. 结论: 获得了人MTHFR(N)编码基因及其原核表达菌株,对研究人MTHFR的生物学功能具有重要的意义.
目的: 剋隆人5,10-亞甲基四氫葉痠還原酶(MTHFR)N耑部分編碼基因,構建重組錶達載體併對其誘導錶達. 方法: 通過RT-PCR方法擴增齣人胎肝組織MTHFR的N耑部分1116 bp的覈苷痠序列,剋隆于載體pGEM-T easy,測序分析後亞剋隆于錶達載體pGEX-4T-2,構建重組錶達載體pGEX- MTHFR(N). 結果: 經過轉化E.coli JM109和BL21後,誘導錶達齣Mr為66×103的蛋白. SDS-PAGE分析顯示,錶達量佔全菌總蛋白質的31%. 結論: 穫得瞭人MTHFR(N)編碼基因及其原覈錶達菌株,對研究人MTHFR的生物學功能具有重要的意義.
목적: 극륭인5,10-아갑기사경협산환원매(MTHFR)N단부분편마기인,구건중조표체재체병대기유도표체. 방법: 통과RT-PCR방법확증출인태간조직MTHFR적N단부분1116 bp적핵감산서렬,극륭우재체pGEM-T easy,측서분석후아극륭우표체재체pGEX-4T-2,구건중조표체재체pGEX- MTHFR(N). 결과: 경과전화E.coli JM109화BL21후,유도표체출Mr위66×103적단백. SDS-PAGE분석현시,표체량점전균총단백질적31%. 결론: 획득료인MTHFR(N)편마기인급기원핵표체균주,대연구인MTHFR적생물학공능구유중요적의의.
