生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
4期
419-423
,共5页
李宏宇%潘初沂%陈涵%赵长江%鲁国东%王宗华
李宏宇%潘初沂%陳涵%趙長江%魯國東%王宗華
리굉우%반초기%진함%조장강%로국동%왕종화
稻瘟病菌%T-DNA%插入突变%功能基因组学
稻瘟病菌%T-DNA%插入突變%功能基因組學
도온병균%T-DNA%삽입돌변%공능기인조학
优化了农杆菌介导转化稻瘟病菌获得T-DNA插入突变的条件,包括选择转化子的潮霉素B用量,抑制农杆菌的抗生素头孢噻肟钠和羧苄青霉素的配比,不同转化阶段培养基的选择等.转化1×106个孢子平均可获得约500个左右的转化子,PCR和TAIL-PCR检测表明约85%转化子中含T-DNA插入.对1520个突变体进行形态变异观察,发现菌落颜色突变的有15个;随机取58个突变体进行比较,发现产孢量减少的4个,孢子萌发率降低的8个,附着胞形成率降低的9个;还获得对水稻品种C101LAC(Pi-1)和75-1-127(Pi-9)致病的突变体,为进一步克隆相应的无毒基因奠定了基础.
優化瞭農桿菌介導轉化稻瘟病菌穫得T-DNA插入突變的條件,包括選擇轉化子的潮黴素B用量,抑製農桿菌的抗生素頭孢噻肟鈉和羧芐青黴素的配比,不同轉化階段培養基的選擇等.轉化1×106箇孢子平均可穫得約500箇左右的轉化子,PCR和TAIL-PCR檢測錶明約85%轉化子中含T-DNA插入.對1520箇突變體進行形態變異觀察,髮現菌落顏色突變的有15箇;隨機取58箇突變體進行比較,髮現產孢量減少的4箇,孢子萌髮率降低的8箇,附著胞形成率降低的9箇;還穫得對水稻品種C101LAC(Pi-1)和75-1-127(Pi-9)緻病的突變體,為進一步剋隆相應的無毒基因奠定瞭基礎.
우화료농간균개도전화도온병균획득T-DNA삽입돌변적조건,포괄선택전화자적조매소B용량,억제농간균적항생소두포새우납화최변청매소적배비,불동전화계단배양기적선택등.전화1×106개포자평균가획득약500개좌우적전화자,PCR화TAIL-PCR검측표명약85%전화자중함T-DNA삽입.대1520개돌변체진행형태변이관찰,발현균락안색돌변적유15개;수궤취58개돌변체진행비교,발현산포량감소적4개,포자맹발솔강저적8개,부착포형성솔강저적9개;환획득대수도품충C101LAC(Pi-1)화75-1-127(Pi-9)치병적돌변체,위진일보극륭상응적무독기인전정료기출.
