同济医科大学学报
同濟醫科大學學報
동제의과대학학보
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAG TONGJI
2001年
4期
300-303
,共4页
王宇哲%申志发%田俊%宗义强%屈伸
王宇哲%申誌髮%田俊%宗義彊%屈伸
왕우철%신지발%전준%종의강%굴신
鸡贫血病毒%基因克隆%细胞凋亡%vp3基因
鷄貧血病毒%基因剋隆%細胞凋亡%vp3基因
계빈혈병독%기인극륭%세포조망%vp3기인
用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的vp3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建了重组体pcDNA-vp3.经酶切鉴定及测序分析表明,该片段和预期相符.在体外利用LipofectAMINETM介导的基因转染,将pc-DNA-vp3、pcDNA3分别转入肝癌细胞系HepG2和二倍体肝细胞系L-02中,转染后的RT-PCR结果证实vp3基因在细胞中得到了表达.同时利用筛选稳定表达细胞株的技术和原位细胞凋亡检测法,证明了鸡贫血病毒是以凋亡的方式诱导细胞死亡,并且只诱导癌细胞的凋亡,而不诱导正常或二倍体细胞死亡.表明鸡贫血病毒vp3基因很可能成为一种极具潜力的抗肿瘤生物制剂.
用PCR方法擴增瞭鷄貧血病毒標準株的vp3基因,併將其剋隆于真覈錶達載體pcDNA3上,構建瞭重組體pcDNA-vp3.經酶切鑒定及測序分析錶明,該片段和預期相符.在體外利用LipofectAMINETM介導的基因轉染,將pc-DNA-vp3、pcDNA3分彆轉入肝癌細胞繫HepG2和二倍體肝細胞繫L-02中,轉染後的RT-PCR結果證實vp3基因在細胞中得到瞭錶達.同時利用篩選穩定錶達細胞株的技術和原位細胞凋亡檢測法,證明瞭鷄貧血病毒是以凋亡的方式誘導細胞死亡,併且隻誘導癌細胞的凋亡,而不誘導正常或二倍體細胞死亡.錶明鷄貧血病毒vp3基因很可能成為一種極具潛力的抗腫瘤生物製劑.
용PCR방법확증료계빈혈병독표준주적vp3기인,병장기극륭우진핵표체재체pcDNA3상,구건료중조체pcDNA-vp3.경매절감정급측서분석표명,해편단화예기상부.재체외이용LipofectAMINETM개도적기인전염,장pc-DNA-vp3、pcDNA3분별전입간암세포계HepG2화이배체간세포계L-02중,전염후적RT-PCR결과증실vp3기인재세포중득도료표체.동시이용사선은정표체세포주적기술화원위세포조망검측법,증명료계빈혈병독시이조망적방식유도세포사망,병차지유도암세포적조망,이불유도정상혹이배체세포사망.표명계빈혈병독vp3기인흔가능성위일충겁구잠력적항종류생물제제.
