生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
3期
281-285
,共5页
郝淑凤%张惟材%袁红杰%王恒梁%黄留玉
郝淑鳳%張惟材%袁紅傑%王恆樑%黃留玉
학숙봉%장유재%원홍걸%왕항량%황류옥
乙内酰脲酶%节杆菌%基因文库%基因表达
乙內酰脲酶%節桿菌%基因文庫%基因錶達
을내선뇨매%절간균%기인문고%기인표체
L-乙内酰脲酶产生菌节杆菌 BT801的染色体DNA经Sau3A I 部分酶切后分离30kb左右的片段,与经HpaI和PstI酶切的黏粒载体pKC505进行连接,将连接产物用包装蛋白包装,转染大肠杆菌DH5α得到10 000多个转化子,构建成节杆菌BT801的基因组文库.通过薄层层析等方法筛选得到了1个阳性克隆,通过亚克隆得到了乙内酰脲酶的完整基因,该基因能分别利用自身的启动子和T5启动子在大肠杆菌中进行表达产生有活性的蛋白.
L-乙內酰脲酶產生菌節桿菌 BT801的染色體DNA經Sau3A I 部分酶切後分離30kb左右的片段,與經HpaI和PstI酶切的黏粒載體pKC505進行連接,將連接產物用包裝蛋白包裝,轉染大腸桿菌DH5α得到10 000多箇轉化子,構建成節桿菌BT801的基因組文庫.通過薄層層析等方法篩選得到瞭1箇暘性剋隆,通過亞剋隆得到瞭乙內酰脲酶的完整基因,該基因能分彆利用自身的啟動子和T5啟動子在大腸桿菌中進行錶達產生有活性的蛋白.
L-을내선뇨매산생균절간균 BT801적염색체DNA경Sau3A I 부분매절후분리30kb좌우적편단,여경HpaI화PstI매절적점립재체pKC505진행련접,장련접산물용포장단백포장,전염대장간균DH5α득도10 000다개전화자,구건성절간균BT801적기인조문고.통과박층층석등방법사선득도료1개양성극륭,통과아극륭득도료을내선뇨매적완정기인,해기인능분별이용자신적계동자화T5계동자재대장간균중진행표체산생유활성적단백.