CAJ | 학술논문

目的:为了探讨EB病毒(EBV)中LMP1的致瘤机制,对鼻咽癌LMP1激活重要的核转录因子NF-κB的机制进行了研究.方法:①以LMP1阴性的鼻咽癌细胞系HNE2及表达载体(pSG5)的鼻咽癌细胞系HNE2-pSG5为对照,采用免疫共沉淀-Western-blotting方法在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2-LMP1中证实LMP1与TRAF2是否直接结合形成免疫共沉淀复合物;②在HNE2-LMP1细胞系导入TRAF2表达质粒或不同剂量TRAF2显性负性突变体(TRAF2Δ6～86)表达质粒,以NF-κB报道基因方法确定LMP1是否通过TRAF2活化NF-κB;③将LMP1(1～231)(CTAR2缺失区)或LMP1Δ187～351(CTAR1缺失区)及不同剂量TRAF2Δ6～86瞬时导入HNE2中以证实LMP1CTAR1或CTAR2是否介导了这种效应;④以转染或未转染TRAF2Δ6～86的HNE2-LMP1细胞系为材料,应用免疫共沉淀-Western-blotting方法,确定TRAF2Δ6～86是否竞争性抑制TRAF2与LMP1结合.结果:①在HNE2-LMP1中LMP1与TRAF2形成复合物沉淀,而HNE2-pSG5和HNE2为阴性.②在HNE2-LMP1细胞系导入TRAF2表达质粒,NF-κB活性增高20倍,而导入不同剂量TRAF2Δ6～86表达质粒时,随着剂量增大,NF-κB活性递减.③TRAF2强烈抑制LMP1(1～231)活化NF-κB,而仅部分抑制LMP1Δ187～351活化NF-κB.④TRAF2Δ6～86竞争性抑制TRAF2与LMP1结合.结论:在鼻咽癌中LMP1通过TRAF2而激活NF-κB,其中LMP1的CTAR1区主要介导了这种效应.这为我们进一步从信号传导通路来探讨LMP1的致癌机制提供了新的线索.
목적:위료탐토EB병독(EBV)중LMP1적치류궤제,대비인암LMP1격활중요적핵전록인자NF-κB적궤제진행료연구.방법:①이LMP1음성적비인암세포계HNE2급표체재체(pSG5)적비인암세포계HNE2-pSG5위대조,채용면역공침정-Western-blotting방법재은정표체LMP1적비인암세포계HNE2-LMP1중증실LMP1여TRAF2시부직접결합형성면역공침정복합물;②재HNE2-LMP1세포계도입TRAF2표체질립혹불동제량TRAF2현성부성돌변체(TRAF2Δ6～86)표체질립,이NF-κB보도기인방법학정LMP1시부통과TRAF2활화NF-κB;③장LMP1(1～231)(CTAR2결실구)혹LMP1Δ187～351(CTAR1결실구)급불동제량TRAF2Δ6～86순시도입HNE2중이증실LMP1CTAR1혹CTAR2시부개도료저충효응;④이전염혹미전염TRAF2Δ6～86적HNE2-LMP1세포계위재료,응용면역공침정-Western-blotting방법,학정TRAF2Δ6～86시부경쟁성억제TRAF2여LMP1결합.결과:①재HNE2-LMP1중LMP1여TRAF2형성복합물침정,이HNE2-pSG5화HNE2위음성.②재HNE2-LMP1세포계도입TRAF2표체질립,NF-κB활성증고20배,이도입불동제량TRAF2Δ6～86표체질립시,수착제량증대,NF-κB활성체감.③TRAF2강렬억제LMP1(1～231)활화NF-κB,이부부분억제LMP1Δ187～351활화NF-κB.④TRAF2Δ6～86경쟁성억제TRAF2여LMP1결합.결론:재비인암중LMP1통과TRAF2이격활NF-κB,기중LMP1적CTAR1구주요개도료저충효응.저위아문진일보종신호전도통로래탐토LMP1적치암궤제제공료신적선색.