南通医学院学报
南通醫學院學報
남통의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE NANTONG
2000年
2期
119-121
,共3页
崔学芝%刘梅%刘炎%谭湘陵%顾晓松
崔學芝%劉梅%劉炎%譚湘陵%顧曉鬆
최학지%류매%류염%담상릉%고효송
Tropic1808基因%克隆%表达%氨基酸序列分析
Tropic1808基因%剋隆%錶達%氨基痠序列分析
Tropic1808기인%극륭%표체%안기산서렬분석
目的:在大肠杆菌宿主系统中表达Tropic1808基因编码的蛋白.方法:用PCR方法从质粒中扩增出Tropic1808cDNA开放阅读框架片段(828bp),并重组入表达载体pET-21a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导Tropic1808融合蛋白的表达,经SDS-PAGE,表达蛋白条带转至PVDF膜进行氨基酸序列分析.结果:构建了pET-21a-1808重组质粒,外源性Tropic1808基因可在大肠杆菌中获得表达,目的蛋白占细菌总蛋白的14%以上,表达蛋白的N端氨基酸序列与基因编码序列一致.结论:Tropic1808基因可在大肠杆菌中获得表达,这为进一步纯化该基因表达蛋白、制备相应抗体以及研究其结构与功能奠定了基础.
目的:在大腸桿菌宿主繫統中錶達Tropic1808基因編碼的蛋白.方法:用PCR方法從質粒中擴增齣Tropic1808cDNA開放閱讀框架片段(828bp),併重組入錶達載體pET-21a中,轉化大腸桿菌BL21(DE3),用IPTG誘導Tropic1808融閤蛋白的錶達,經SDS-PAGE,錶達蛋白條帶轉至PVDF膜進行氨基痠序列分析.結果:構建瞭pET-21a-1808重組質粒,外源性Tropic1808基因可在大腸桿菌中穫得錶達,目的蛋白佔細菌總蛋白的14%以上,錶達蛋白的N耑氨基痠序列與基因編碼序列一緻.結論:Tropic1808基因可在大腸桿菌中穫得錶達,這為進一步純化該基因錶達蛋白、製備相應抗體以及研究其結構與功能奠定瞭基礎.
목적:재대장간균숙주계통중표체Tropic1808기인편마적단백.방법:용PCR방법종질립중확증출Tropic1808cDNA개방열독광가편단(828bp),병중조입표체재체pET-21a중,전화대장간균BL21(DE3),용IPTG유도Tropic1808융합단백적표체,경SDS-PAGE,표체단백조대전지PVDF막진행안기산서렬분석.결과:구건료pET-21a-1808중조질립,외원성Tropic1808기인가재대장간균중획득표체,목적단백점세균총단백적14%이상,표체단백적N단안기산서렬여기인편마서렬일치.결론:Tropic1808기인가재대장간균중획득표체,저위진일보순화해기인표체단백、제비상응항체이급연구기결구여공능전정료기출.