中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2003年
2期
174-177
,共4页
秦智锋%钟安清%杨宝华%叶奕优
秦智鋒%鐘安清%楊寶華%葉奕優
진지봉%종안청%양보화%협혁우
基因芯片%基因扫描%杂交%水泡性疾病
基因芯片%基因掃描%雜交%水泡性疾病
기인심편%기인소묘%잡교%수포성질병
为了对临床上症状非常相似的四种水泡性动物疾病进行大批量、快速准确的检测,我们尝试用基因芯片技术来对这四种水泡性疾病进行快速鉴别诊断.用Qiaquick 96 plate Kit对扩增的39个基因目的片段进行纯化,TE调配浓度至0.36μg/μL,于GMS417点样仪上按预选设计好的布阵方式点样,然后经紫外灯照射进行紫外交联等一系列处理.用Salmon进行非特异性杂交检测芯片点样的质量.大量抽提组织中FMDV和细胞上清液中的SVDV的总RNA,随机引物反转录的同时采用随机荧光标记法,标记FMDV和SVDV.标记好的cDNA超声波随机打断后进行特异性杂交,以最佳光扫描强度进行扫描,Imagene软件扫描结果,对两者信号进行对比,结合各病毒相对应的坐标,可鉴别诊断出四种动物的水泡性疾病病毒.本方法不但快速、灵敏、准确性高,而且可实现对大批量货物的集成化检测,满足我国快速通关的要求.
為瞭對臨床上癥狀非常相似的四種水泡性動物疾病進行大批量、快速準確的檢測,我們嘗試用基因芯片技術來對這四種水泡性疾病進行快速鑒彆診斷.用Qiaquick 96 plate Kit對擴增的39箇基因目的片段進行純化,TE調配濃度至0.36μg/μL,于GMS417點樣儀上按預選設計好的佈陣方式點樣,然後經紫外燈照射進行紫外交聯等一繫列處理.用Salmon進行非特異性雜交檢測芯片點樣的質量.大量抽提組織中FMDV和細胞上清液中的SVDV的總RNA,隨機引物反轉錄的同時採用隨機熒光標記法,標記FMDV和SVDV.標記好的cDNA超聲波隨機打斷後進行特異性雜交,以最佳光掃描彊度進行掃描,Imagene軟件掃描結果,對兩者信號進行對比,結閤各病毒相對應的坐標,可鑒彆診斷齣四種動物的水泡性疾病病毒.本方法不但快速、靈敏、準確性高,而且可實現對大批量貨物的集成化檢測,滿足我國快速通關的要求.
위료대림상상증상비상상사적사충수포성동물질병진행대비량、쾌속준학적검측,아문상시용기인심편기술래대저사충수포성질병진행쾌속감별진단.용Qiaquick 96 plate Kit대확증적39개기인목적편단진행순화,TE조배농도지0.36μg/μL,우GMS417점양의상안예선설계호적포진방식점양,연후경자외등조사진행자외교련등일계렬처리.용Salmon진행비특이성잡교검측심편점양적질량.대량추제조직중FMDV화세포상청액중적SVDV적총RNA,수궤인물반전록적동시채용수궤형광표기법,표기FMDV화SVDV.표기호적cDNA초성파수궤타단후진행특이성잡교,이최가광소묘강도진행소묘,Imagene연건소묘결과,대량자신호진행대비,결합각병독상대응적좌표,가감별진단출사충동물적수포성질병병독.본방법불단쾌속、령민、준학성고,이차가실현대대비량화물적집성화검측,만족아국쾌속통관적요구.
