生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2003年
1期
16-19
,共4页
刘继中%纪宗玲%朱帮福%陶惠人%胡蕴玉%陈苏民
劉繼中%紀宗玲%硃幫福%陶惠人%鬍蘊玉%陳囌民
류계중%기종령%주방복%도혜인%호온옥%진소민
骨形态发生蛋白-2%腺病毒%基因表达
骨形態髮生蛋白-2%腺病毒%基因錶達
골형태발생단백-2%선병독%기인표체
将人BMP-2的编码区cDNA克隆至穿梭载体pShuttle,以PI-SceI和I-CeuI切下含BMP-2编码区cDNA的片断,在体外与PI-SceI/I-CeuI切开的腺病毒DNA连接,构建重组有BMP-2全长编码区基因的腺病毒DNA,PCR鉴定正确后,经PacI酶切线性化,在脂质体介导下转染HEK293细胞,反复冻融制备重组腺病毒,空斑形成试验测定病毒滴度约为7.5×106～1.5×107pfu/ml.以BMP-2重组腺病毒感染体外培养的小鼠成肌细胞C2C12,Western blot检测证实有BMP-2表达.
將人BMP-2的編碼區cDNA剋隆至穿梭載體pShuttle,以PI-SceI和I-CeuI切下含BMP-2編碼區cDNA的片斷,在體外與PI-SceI/I-CeuI切開的腺病毒DNA連接,構建重組有BMP-2全長編碼區基因的腺病毒DNA,PCR鑒定正確後,經PacI酶切線性化,在脂質體介導下轉染HEK293細胞,反複凍融製備重組腺病毒,空斑形成試驗測定病毒滴度約為7.5×106～1.5×107pfu/ml.以BMP-2重組腺病毒感染體外培養的小鼠成肌細胞C2C12,Western blot檢測證實有BMP-2錶達.
장인BMP-2적편마구cDNA극륭지천사재체pShuttle,이PI-SceI화I-CeuI절하함BMP-2편마구cDNA적편단,재체외여PI-SceI/I-CeuI절개적선병독DNA련접,구건중조유BMP-2전장편마구기인적선병독DNA,PCR감정정학후,경PacI매절선성화,재지질체개도하전염HEK293세포,반복동융제비중조선병독,공반형성시험측정병독적도약위7.5×106～1.5×107pfu/ml.이BMP-2중조선병독감염체외배양적소서성기세포C2C12,Western blot검측증실유BMP-2표체.
