复旦学报(自然科学版)
複旦學報(自然科學版)
복단학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2002年
6期
660-663
,共4页
李宁军%李琳%江培翃%李盛%黄伟达
李寧軍%李琳%江培翃%李盛%黃偉達
리저군%리림%강배굉%리성%황위체
乳酸脱氢酶%双叉双歧杆菌%表达
乳痠脫氫酶%雙扠雙歧桿菌%錶達
유산탈경매%쌍차쌍기간균%표체
以大肠杆菌-双叉双歧杆菌的穿梭质粒pHJ为基础,插入从Lactococcus lactis总DNA中用PCR方法扩增得到的报告基因乳酸脱氢酶基因(ldh),构建了双叉双歧杆菌的表达质粒pHJ-LDH,并采用电转化法导入双叉双歧杆菌进行了表达研究. 对双叉双歧杆菌总蛋白的SDS-PAGE分析结果表明,ldh报告基因的表达产物形成了明显的条带,Western-blotting结果确认了该条带为ldh基因的产物. LDH的酶活性定量测定结果表明,重组双叉双歧杆菌的蛋白粗抽提液中LDH的比活性为 5.5 U/mg,菌中LDH的表达量约为2 mg/L. 此工作为今后双叉双歧杆菌的基因工程奠定了基础.
以大腸桿菌-雙扠雙歧桿菌的穿梭質粒pHJ為基礎,插入從Lactococcus lactis總DNA中用PCR方法擴增得到的報告基因乳痠脫氫酶基因(ldh),構建瞭雙扠雙歧桿菌的錶達質粒pHJ-LDH,併採用電轉化法導入雙扠雙歧桿菌進行瞭錶達研究. 對雙扠雙歧桿菌總蛋白的SDS-PAGE分析結果錶明,ldh報告基因的錶達產物形成瞭明顯的條帶,Western-blotting結果確認瞭該條帶為ldh基因的產物. LDH的酶活性定量測定結果錶明,重組雙扠雙歧桿菌的蛋白粗抽提液中LDH的比活性為 5.5 U/mg,菌中LDH的錶達量約為2 mg/L. 此工作為今後雙扠雙歧桿菌的基因工程奠定瞭基礎.
이대장간균-쌍차쌍기간균적천사질립pHJ위기출,삽입종Lactococcus lactis총DNA중용PCR방법확증득도적보고기인유산탈경매기인(ldh),구건료쌍차쌍기간균적표체질립pHJ-LDH,병채용전전화법도입쌍차쌍기간균진행료표체연구. 대쌍차쌍기간균총단백적SDS-PAGE분석결과표명,ldh보고기인적표체산물형성료명현적조대,Western-blotting결과학인료해조대위ldh기인적산물. LDH적매활성정량측정결과표명,중조쌍차쌍기간균적단백조추제액중LDH적비활성위 5.5 U/mg,균중LDH적표체량약위2 mg/L. 차공작위금후쌍차쌍기간균적기인공정전정료기출.