中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2002年
5期
383-386
,共4页
阳小卫%岑建农%王玮%夏学鸣%陈子兴
暘小衛%岑建農%王瑋%夏學鳴%陳子興
양소위%잠건농%왕위%하학명%진자흥
骨髓基质细胞%造血干/祖细胞%基因转导%多药耐药基因
骨髓基質細胞%造血榦/祖細胞%基因轉導%多藥耐藥基因
골수기질세포%조혈간/조세포%기인전도%다약내약기인
为探讨建立原代骨髓基质细胞层的方法并观察基质接触对造血干/祖细胞(HSC/HPC)基因转移的影响,采用Ficoll-Hypaque分离成人骨髓单个核细胞(MNC),用基质细胞培养液培养,传代4次以建立原代骨髓基质细胞层.将经细胞因子预刺激的造血干/祖细胞接种到经辐照处理的基质细胞层上,进行逆转录病毒介导的多药耐药基因(mdr1)转导,以半固体集落培养和聚合酶链反应法(PCR)检测长春新碱(VCR)抗性集落数和mdr1基因扩增片段以测定转导效率.结果表明:原代骨髓基质细胞培养传代4-6周形成混合贴壁细胞层,主要由成纤维细胞组成.集落法和PCR法检测显示基质接触能提高骨髓造血干/祖细胞基因转导效率2.1-3.3倍,对逆转录病毒介导的造血干/祖细胞基因转导具有明显的支持效应.结论:基质细胞接触联合细胞因子作用可提高逆转录病毒介导的造血干/祖细胞基因转导效率.
為探討建立原代骨髓基質細胞層的方法併觀察基質接觸對造血榦/祖細胞(HSC/HPC)基因轉移的影響,採用Ficoll-Hypaque分離成人骨髓單箇覈細胞(MNC),用基質細胞培養液培養,傳代4次以建立原代骨髓基質細胞層.將經細胞因子預刺激的造血榦/祖細胞接種到經輻照處理的基質細胞層上,進行逆轉錄病毒介導的多藥耐藥基因(mdr1)轉導,以半固體集落培養和聚閤酶鏈反應法(PCR)檢測長春新堿(VCR)抗性集落數和mdr1基因擴增片段以測定轉導效率.結果錶明:原代骨髓基質細胞培養傳代4-6週形成混閤貼壁細胞層,主要由成纖維細胞組成.集落法和PCR法檢測顯示基質接觸能提高骨髓造血榦/祖細胞基因轉導效率2.1-3.3倍,對逆轉錄病毒介導的造血榦/祖細胞基因轉導具有明顯的支持效應.結論:基質細胞接觸聯閤細胞因子作用可提高逆轉錄病毒介導的造血榦/祖細胞基因轉導效率.
위탐토건립원대골수기질세포층적방법병관찰기질접촉대조혈간/조세포(HSC/HPC)기인전이적영향,채용Ficoll-Hypaque분리성인골수단개핵세포(MNC),용기질세포배양액배양,전대4차이건립원대골수기질세포층.장경세포인자예자격적조혈간/조세포접충도경복조처리적기질세포층상,진행역전록병독개도적다약내약기인(mdr1)전도,이반고체집락배양화취합매련반응법(PCR)검측장춘신감(VCR)항성집락수화mdr1기인확증편단이측정전도효솔.결과표명:원대골수기질세포배양전대4-6주형성혼합첩벽세포층,주요유성섬유세포조성.집락법화PCR법검측현시기질접촉능제고골수조혈간/조세포기인전도효솔2.1-3.3배,대역전록병독개도적조혈간/조세포기인전도구유명현적지지효응.결론:기질세포접촉연합세포인자작용가제고역전록병독개도적조혈간/조세포기인전도효솔.
