微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2002年
6期
63-67
,共5页
陈强%张小平%李登煜%陈文新%K.Lindstrm%Z.Terefework
陳彊%張小平%李登煜%陳文新%K.Lindstrm%Z.Terefework
진강%장소평%리등욱%진문신%K.Lindstrm%Z.Terefework
豆科植物%根瘤%DNA提取%AFLP指纹图谱
豆科植物%根瘤%DNA提取%AFLP指紋圖譜
두과식물%근류%DNA제취%AFLP지문도보
豆科植物的新鲜根瘤经表面灭菌、破碎后直接加入200μL 4mol/L异硫氰酸胍(GUTC)裂解液混匀,离心去掉根瘤残留物,再加入适量RNA酶,37℃温育30min后,加入20μL硅藻土吸附液,室温处理15min离心去掉上清,沉淀经GUTC裂解液二次处理,再分别用洗涤液、70%酒精洗涤.最后,硅藻土沉淀经真空干燥,加入20μL超纯水洗涤硅藻土沉淀,即可获得类菌体根瘤菌DNA.所获得的DNA可以用于AFLP、16S rRNAPCR反应.
豆科植物的新鮮根瘤經錶麵滅菌、破碎後直接加入200μL 4mol/L異硫氰痠胍(GUTC)裂解液混勻,離心去掉根瘤殘留物,再加入適量RNA酶,37℃溫育30min後,加入20μL硅藻土吸附液,室溫處理15min離心去掉上清,沉澱經GUTC裂解液二次處理,再分彆用洗滌液、70%酒精洗滌.最後,硅藻土沉澱經真空榦燥,加入20μL超純水洗滌硅藻土沉澱,即可穫得類菌體根瘤菌DNA.所穫得的DNA可以用于AFLP、16S rRNAPCR反應.
두과식물적신선근류경표면멸균、파쇄후직접가입200μL 4mol/L이류청산고(GUTC)렬해액혼균,리심거도근류잔류물,재가입괄량RNA매,37℃온육30min후,가입20μL규조토흡부액,실온처리15min리심거도상청,침정경GUTC렬해액이차처리,재분별용세조액、70%주정세조.최후,규조토침정경진공간조,가입20μL초순수세조규조토침정,즉가획득류균체근류균DNA.소획득적DNA가이용우AFLP、16S rRNAPCR반응.
