免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2002年
4期
311-314
,共4页
范慧%莫晓宁%曹丽%宋泉声%黄大无%马大龙
範慧%莫曉寧%曹麗%宋泉聲%黃大無%馬大龍
범혜%막효저%조려%송천성%황대무%마대룡
趋化因子%MPIF-1β%MPIF-1%重组蛋白
趨化因子%MPIF-1β%MPIF-1%重組蛋白
추화인자%MPIF-1β%MPIF-1%중조단백
目的为深入研究趋化因子新变异体MPIF-1β的结构与功能,利用pKPL3a-MPIF-1β 表达质粒进行原核表达、纯化工艺研究及活性检测.方法 MPIF-1β重组蛋白以包涵体形式存在,占总菌体蛋白的 15%,工程菌经超声破碎,包涵体洗涤,变性、复性、肝素Sepharose CL-6B 亲和层析,CM Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200层析分离获得目的蛋白.结果还原SDS-PAGE分析相对分子质量15 000 u,纯度99.0%,纯化倍数6.6倍,总回收率9.07%.体外生物学活性检测证明MPIF-1β 重组蛋白对小鼠骨髓集落形成具有抑制作用,对U937细胞具有趋化活性,且呈一定的剂量依赖关系.结论建立了简便可行的MPIF-1β重组蛋白纯化路线,初步证明了MPIF-1β的生物学活性.
目的為深入研究趨化因子新變異體MPIF-1β的結構與功能,利用pKPL3a-MPIF-1β 錶達質粒進行原覈錶達、純化工藝研究及活性檢測.方法 MPIF-1β重組蛋白以包涵體形式存在,佔總菌體蛋白的 15%,工程菌經超聲破碎,包涵體洗滌,變性、複性、肝素Sepharose CL-6B 親和層析,CM Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200層析分離穫得目的蛋白.結果還原SDS-PAGE分析相對分子質量15 000 u,純度99.0%,純化倍數6.6倍,總迴收率9.07%.體外生物學活性檢測證明MPIF-1β 重組蛋白對小鼠骨髓集落形成具有抑製作用,對U937細胞具有趨化活性,且呈一定的劑量依賴關繫.結論建立瞭簡便可行的MPIF-1β重組蛋白純化路線,初步證明瞭MPIF-1β的生物學活性.
목적위심입연구추화인자신변이체MPIF-1β적결구여공능,이용pKPL3a-MPIF-1β 표체질립진행원핵표체、순화공예연구급활성검측.방법 MPIF-1β중조단백이포함체형식존재,점총균체단백적 15%,공정균경초성파쇄,포함체세조,변성、복성、간소Sepharose CL-6B 친화층석,CM Sepharose Fast Flow화Sephacryl S-200층석분리획득목적단백.결과환원SDS-PAGE분석상대분자질량15 000 u,순도99.0%,순화배수6.6배,총회수솔9.07%.체외생물학활성검측증명MPIF-1β 중조단백대소서골수집락형성구유억제작용,대U937세포구유추화활성,차정일정적제량의뢰관계.결론건립료간편가행적MPIF-1β중조단백순화로선,초보증명료MPIF-1β적생물학활성.
