CAJ | 학술논문

临床获得1株鸡致病性大肠杆菌CE01,进行药敏、质粒转化、耐药质粒消除试验,结果该菌对11种受试抗菌药物全部呈高度耐药,其中氧氟沙星的MIC≥50ug/ml,且含有喹诺酮抗性质粒,溴化乙淀和黄连素作为消除剂作用48小时可使其喹诺酮抗性质粒消除,耐药水平显著下降.聚合酶链反应(PCR)扩增该菌gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR),质粒DNA和染色体DNA均可扩增出长度为668bp的PCR产物片段.经测序分析,两者基因序列相同率为98.17%,相同位点突变相同的碱基有5个,相同位点突变不同的碱基有2个;与基因数据库Swanberg等报道的大肠杆菌gyrA基因相应序列比较,该菌质粒DNAPCR产物同源率97.8%,有13个位点发生突变,3个氨基酸被替换;染色体DNA PCR产物同源率98%,有12个位点发生突变,2个氨基酸被替换.用放射性同位素α-32P分别标记CE01菌株染色体DNA和质粒DNA的PCR扩增片段制备探针,对CE01菌株进行检测.质粒DNA和染色体DNA分别与质粒探针和染色体探针杂交出现典型的阳性杂交斑.证实该菌株质粒和染色体上同时存在耐喹诺酮gyrA突变基因,对喹诺酮的耐药性是质粒介导和染色体突变共同作用的结果.
림상획득1주계치병성대장간균CE01,진행약민、질립전화、내약질립소제시험,결과해균대11충수시항균약물전부정고도내약,기중양불사성적MIC≥50ug/ml,차함유규낙동항성질립,추화을정화황련소작위소제제작용48소시가사기규낙동항성질립소제,내약수평현저하강.취합매련반응(PCR)확증해균gyrA기인규낙동내약결정구(QRDR),질립DNA화염색체DNA균가확증출장도위668bp적PCR산물편단.경측서분석,량자기인서렬상동솔위98.17%,상동위점돌변상동적감기유5개,상동위점돌변불동적감기유2개;여기인수거고Swanberg등보도적대장간균gyrA기인상응서렬비교,해균질립DNAPCR산물동원솔97.8%,유13개위점발생돌변,3개안기산피체환;염색체DNA PCR산물동원솔98%,유12개위점발생돌변,2개안기산피체환.용방사성동위소α-32P분별표기CE01균주염색체DNA화질립DNA적PCR확증편단제비탐침,대CE01균주진행검측.질립DNA화염색체DNA분별여질립탐침화염색체탐침잡교출현전형적양성잡교반.증실해균주질립화염색체상동시존재내규낙동gyrA돌변기인,대규낙동적내약성시질립개도화염색체돌변공동작용적결과.