生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2000年
5期
566-569
,共4页
贺华君%杨卫东%常雅宁%施惠娟%杨冠珍%吴祥甫%袁勤生
賀華君%楊衛東%常雅寧%施惠娟%楊冠珍%吳祥甫%袁勤生
하화군%양위동%상아저%시혜연%양관진%오상보%원근생
癌胚抗原%单链抗体%Mn-SOD%融合表达
癌胚抗原%單鏈抗體%Mn-SOD%融閤錶達
암배항원%단련항체%Mn-SOD%융합표체
将Mn-SOD与抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因(ScFv gene)融合,重组到含T7启动子的表达载体pET-22b(+)中,构建表达质粒pETMn-SOD-ScFv,并转化大肠杆菌BL21(DE3),进行高效表达,表达物占菌体可溶性总蛋白的24%.SDS-PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物分子量为45kD与融合基因编码蛋白质的理论值相符.该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达有利于纯化.RIA测定表明表达产物能特异性的与抗原CEA结合,同时邻苯三酚法测定也表明表达产物具有SOD酶的活性,该融合蛋白为分泌CEA肿瘤的靶向性治疗提供新的途径.
將Mn-SOD與抗癌胚抗原(CEA)單鏈抗體基因(ScFv gene)融閤,重組到含T7啟動子的錶達載體pET-22b(+)中,構建錶達質粒pETMn-SOD-ScFv,併轉化大腸桿菌BL21(DE3),進行高效錶達,錶達物佔菌體可溶性總蛋白的24%.SDS-PAGE和蛋白質印跡圖譜顯示錶達物分子量為45kD與融閤基因編碼蛋白質的理論值相符.該蛋白質在大腸桿菌中為分泌型錶達有利于純化.RIA測定錶明錶達產物能特異性的與抗原CEA結閤,同時鄰苯三酚法測定也錶明錶達產物具有SOD酶的活性,該融閤蛋白為分泌CEA腫瘤的靶嚮性治療提供新的途徑.
장Mn-SOD여항암배항원(CEA)단련항체기인(ScFv gene)융합,중조도함T7계동자적표체재체pET-22b(+)중,구건표체질립pETMn-SOD-ScFv,병전화대장간균BL21(DE3),진행고효표체,표체물점균체가용성총단백적24%.SDS-PAGE화단백질인적도보현시표체물분자량위45kD여융합기인편마단백질적이론치상부.해단백질재대장간균중위분비형표체유리우순화.RIA측정표명표체산물능특이성적여항원CEA결합,동시린분삼분법측정야표명표체산물구유SOD매적활성,해융합단백위분비CEA종류적파향성치료제공신적도경.
