岭南心血管病杂志
嶺南心血管病雜誌
령남심혈관병잡지
SOUTH CHINA JOURNAL OF CARDIOLOGY
2006年
1期
55-57
,共3页
苏健%董太明%陈志红%陈剑光%吴红穗%单志新
囌健%董太明%陳誌紅%陳劍光%吳紅穗%單誌新
소건%동태명%진지홍%진검광%오홍수%단지신
A组链球菌%emm基因%DNA%疫苗
A組鏈毬菌%emm基因%DNA%疫苗
A조련구균%emm기인%DNA%역묘
目的构建含A组链球菌M蛋白基因(emm基因)1型和3型特异性抗原决定簇基因的重组质粒.方法用PCR技术从40381137(T1)型和31281187(T3)型A组链球菌中分别扩增emm基因,插入T载体后测序、blast后分别确定为emm1和emm3基因型,再从emm1和emm3基因分别扩增105 bp目的基因,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术将两目的片段连接起来.插入真核表达载体pSecTaqB中,阳性质粒克隆经酶切和测序鉴定.结果从40381137(T1)和31281187(T3)A组链球菌株的基因组成功克隆emm基因,经测序及blast后分别确认为emm1型和emm3型;用pstⅠ和BamH Ⅰ酶切重组质粒pSemm1-3、测序均显示插入正确.结论成功构建A组莲球菌的emm1型和emm3型二价真核表达载体,为下一步研究表达功能及表达蛋白的生物活性打下基础.
目的構建含A組鏈毬菌M蛋白基因(emm基因)1型和3型特異性抗原決定簇基因的重組質粒.方法用PCR技術從40381137(T1)型和31281187(T3)型A組鏈毬菌中分彆擴增emm基因,插入T載體後測序、blast後分彆確定為emm1和emm3基因型,再從emm1和emm3基因分彆擴增105 bp目的基因,用聚閤酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)技術將兩目的片段連接起來.插入真覈錶達載體pSecTaqB中,暘性質粒剋隆經酶切和測序鑒定.結果從40381137(T1)和31281187(T3)A組鏈毬菌株的基因組成功剋隆emm基因,經測序及blast後分彆確認為emm1型和emm3型;用pstⅠ和BamH Ⅰ酶切重組質粒pSemm1-3、測序均顯示插入正確.結論成功構建A組蓮毬菌的emm1型和emm3型二價真覈錶達載體,為下一步研究錶達功能及錶達蛋白的生物活性打下基礎.
목적구건함A조련구균M단백기인(emm기인)1형화3형특이성항원결정족기인적중조질립.방법용PCR기술종40381137(T1)형화31281187(T3)형A조련구균중분별확증emm기인,삽입T재체후측서、blast후분별학정위emm1화emm3기인형,재종emm1화emm3기인분별확증105 bp목적기인,용취합매련반응(polymerase chain reaction,PCR)기술장량목적편단련접기래.삽입진핵표체재체pSecTaqB중,양성질립극륭경매절화측서감정.결과종40381137(T1)화31281187(T3)A조련구균주적기인조성공극륭emm기인,경측서급blast후분별학인위emm1형화emm3형;용pstⅠ화BamH Ⅰ매절중조질립pSemm1-3、측서균현시삽입정학.결론성공구건A조련구균적emm1형화emm3형이개진핵표체재체,위하일보연구표체공능급표체단백적생물활성타하기출.
