CAJ | 학술논문

目的应用PCR-SSCP检测常规及BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌临床分离株KatG、rpoB、rpsL基因突变,分析其敏感性和特异性,评价其在检测结核分枝杆菌耐药性方面的价值和临床实用性.方法22株常规培养和8株BACTEC培养检出的高浓度及低浓度耐INH、RFP、SM耐多药结核分枝杆菌分离株,分别用PCR-SSCP检测KatG、rpoB、rpsL基因,观察其电泳条带,并与结核菌标准株H37Rv对比.结果22株常规培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中,KatG、rpoB、rpsLPCR扩增产物,用SSCP分别检出KatG基因16株(72.7%)、rpoB基因19株(86.4%)和rpsL基因14株(63.6%).8株BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中分别检出KatG基因5株(62.5%),rpoB基因6株(75%)、rpsL基因5株(62.5%).综合两者KatG、rpoB和rpsL基因检出率分别为70.0%(21/30)、83.3%(25/30)和63.3%(19/30).高浓度耐药与低浓度耐药分离株中的检出率有显著差异(P＜0.05),常规培养与BACTEC培养分离株中的检出率无显著差异(P＞0.05),与结核菌标准株H37Rv电泳条带对比,特异性为100%,敏感性97%.结论PCR-SSCP敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌的KatG、rpoB和rpsL基因,可用于耐多药结核分枝杆菌的临床检测.
목적응용PCR-SSCP검측상규급BACTEC배양내INH、RFP、SM적내다약결핵분지간균림상분리주KatG、rpoB、rpsL기인돌변,분석기민감성화특이성,평개기재검측결핵분지간균내약성방면적개치화림상실용성.방법22주상규배양화8주BACTEC배양검출적고농도급저농도내INH、RFP、SM내다약결핵분지간균분리주,분별용PCR-SSCP검측KatG、rpoB、rpsL기인,관찰기전영조대,병여결핵균표준주H37Rv대비.결과22주상규배양내INH、RFP、SM적내다약결핵분지간균분리주중,KatG、rpoB、rpsLPCR확증산물,용SSCP분별검출KatG기인16주(72.7%)、rpoB기인19주(86.4%)화rpsL기인14주(63.6%).8주BACTEC배양내INH、RFP、SM적내다약결핵분지간균분리주중분별검출KatG기인5주(62.5%),rpoB기인6주(75%)、rpsL기인5주(62.5%).종합량자KatG、rpoB화rpsL기인검출솔분별위70.0%(21/30)、83.3%(25/30)화63.3%(19/30).고농도내약여저농도내약분리주중적검출솔유현저차이(P＜0.05),상규배양여BACTEC배양분리주중적검출솔무현저차이(P＞0.05),여결핵균표준주H37Rv전영조대대비,특이성위100%,민감성97%.결론PCR-SSCP민감、특이,가쾌속검측결핵분지간균적KatG、rpoB화rpsL기인,가용우내다약결핵분지간균적림상검측.