以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA
이소맥근첨분생조직세포핵급염색체제비고분자량DNA
High Molecular Weight DNA Preparation from Nuclei or Chromosomes of Root Meristem of Wheat
  • 万方数据
    作物学报 작물학보
    ACTA AGRONOMICA SINICA
    2006年 12期 1920-1923 ,共4页

    郭东伟%佘茂云%李连城%陈耀峰%陈明%徐兆师%马有志

    곽동위%사무운%리련성%진요봉%진명%서조사%마유지

    高分子量DNA%蔗糖密度梯度离心%细胞周期同步化%染色体流式分选%BAC 高分子量DNA%蔗糖密度梯度離心%細胞週期同步化%染色體流式分選%BAC
    고분자량DNA%자당밀도제도리심%세포주기동보화%염색체류식분선%BAC
    为了克服以叶片为材提取HMW DNA的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法.该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得HMW DNA.经检测,来自200条根尖(10个胶块)的HMW DNA的浓度约为4～20 ng/μL,而连接、转化后的BAC克隆平均插入片段超过100 kb.证明该法适用于提取HMW DNA以构建BAC文库.
    위료극복이협편위재제취HMW DNA적국한성,우화료일투간편、실용적제취방법.해법이세포주기동보화처리적근첨분생조직위재료,이용궤계균장석방세포핵혹중기염색체제비현부액,재이자당밀도제도리심화류식분선기술분별분리세포핵화염색체,경거단백、매절、투석,획득HMW DNA.경검측,래자200조근첨(10개효괴)적HMW DNA적농도약위4～20 ng/μL,이련접、전화후적BAC극륭평균삽입편단초과100 kb.증명해법괄용우제취HMW DNA이구건BAC문고.
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