中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
2期
139-143
,共5页
吴红阳%林汉良%朱有凯%古聪敏%叶子茵%张萌
吳紅暘%林漢良%硃有凱%古聰敏%葉子茵%張萌
오홍양%림한량%주유개%고총민%협자인%장맹
白血病%BIRC7%RNAi%Jurkat稳定细胞系
白血病%BIRC7%RNAi%Jurkat穩定細胞繫
백혈병%BIRC7%RNAi%Jurkat은정세포계
[目的]通过RNA干扰技术(RNAi)建立稳定性BIRC7基因沉默的Jurkat实验细胞模型.[方法]应用pSilencer 4.1-CMV neo构建BIRC7 shRNA表达载体,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞.利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RT-PCR和Western blot等技术检测细胞BIRC7表达水平.[结果]成功筛选出分别携带二种重组shRNA表达的Jurkat细胞系.与对照组细胞相比,转染BIRC7 8hRNA的细胞BIRC7 mRNA表达下降约>70%,BIRC7蛋白表达减少>60%.生长曲线显示生长速度减慢.细胞倍增时间延长,细胞凋亡率增加.[结论]稳定转染重组BIRC7 shRNA表达载体能有效干扰BIRC7基因表达.表明RNAi技术可以成为研究BIRC7基因功能的有效工具.BIRC7有可能成为T-淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤治疗的潜在新靶点.
[目的]通過RNA榦擾技術(RNAi)建立穩定性BIRC7基因沉默的Jurkat實驗細胞模型.[方法]應用pSilencer 4.1-CMV neo構建BIRC7 shRNA錶達載體,採用脂質體將載體導入Jurkat細胞.利用G418篩選齣穩定錶達shRNA細胞後,行RT-PCR和Western blot等技術檢測細胞BIRC7錶達水平.[結果]成功篩選齣分彆攜帶二種重組shRNA錶達的Jurkat細胞繫.與對照組細胞相比,轉染BIRC7 8hRNA的細胞BIRC7 mRNA錶達下降約>70%,BIRC7蛋白錶達減少>60%.生長麯線顯示生長速度減慢.細胞倍增時間延長,細胞凋亡率增加.[結論]穩定轉染重組BIRC7 shRNA錶達載體能有效榦擾BIRC7基因錶達.錶明RNAi技術可以成為研究BIRC7基因功能的有效工具.BIRC7有可能成為T-淋巴母細胞性白血病/淋巴瘤治療的潛在新靶點.
[목적]통과RNA간우기술(RNAi)건립은정성BIRC7기인침묵적Jurkat실험세포모형.[방법]응용pSilencer 4.1-CMV neo구건BIRC7 shRNA표체재체,채용지질체장재체도입Jurkat세포.이용G418사선출은정표체shRNA세포후,행RT-PCR화Western blot등기술검측세포BIRC7표체수평.[결과]성공사선출분별휴대이충중조shRNA표체적Jurkat세포계.여대조조세포상비,전염BIRC7 8hRNA적세포BIRC7 mRNA표체하강약>70%,BIRC7단백표체감소>60%.생장곡선현시생장속도감만.세포배증시간연장,세포조망솔증가.[결론]은정전염중조BIRC7 shRNA표체재체능유효간우BIRC7기인표체.표명RNAi기술가이성위연구BIRC7기인공능적유효공구.BIRC7유가능성위T-림파모세포성백혈병/림파류치료적잠재신파점.