中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
14期
37-41
,共5页
油菜%转基因植株%NPT-Ⅱ%筛选方法
油菜%轉基因植株%NPT-Ⅱ%篩選方法
유채%전기인식주%NPT-Ⅱ%사선방법
为获得一种简便的筛选含有NPT-Ⅱ标记基因的转基因油菜种子的方法,对卡那霉素溶液叶片涂抹法、种子浸泡法以及卡那霉素MS培养基筛选3种方法进行研究.结果表明,3种筛选方法的最佳卡那霉素选择压为200 mg/L;涂抹叶片法4～5天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的4株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性达100%;浸泡种子法2～3天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的5株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性100%;MS培养基筛选法一般10天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到20株植株,移栽后存活5株,PCR检测3株呈阳性,2株是假阳性植株,可靠性为60%.因此,可以认为卡那霉素涂抹叶片和浸泡种子两种方法是转基因油菜进行大规模、快速的筛选及后代的遗传分析的理想方法.
為穫得一種簡便的篩選含有NPT-Ⅱ標記基因的轉基因油菜種子的方法,對卡那黴素溶液葉片塗抹法、種子浸泡法以及卡那黴素MS培養基篩選3種方法進行研究.結果錶明,3種篩選方法的最佳卡那黴素選擇壓為200 mg/L;塗抹葉片法4～5天可以明顯識彆植株對卡那黴素抗性與否,此法篩選到的4株植株PCR檢測全部呈暘性,可靠性達100%;浸泡種子法2～3天可以明顯識彆植株對卡那黴素抗性與否,此法篩選到的5株植株PCR檢測全部呈暘性,可靠性100%;MS培養基篩選法一般10天可以明顯識彆植株對卡那黴素抗性與否,此法篩選到20株植株,移栽後存活5株,PCR檢測3株呈暘性,2株是假暘性植株,可靠性為60%.因此,可以認為卡那黴素塗抹葉片和浸泡種子兩種方法是轉基因油菜進行大規模、快速的篩選及後代的遺傳分析的理想方法.
위획득일충간편적사선함유NPT-Ⅱ표기기인적전기인유채충자적방법,대잡나매소용액협편도말법、충자침포법이급잡나매소MS배양기사선3충방법진행연구.결과표명,3충사선방법적최가잡나매소선택압위200 mg/L;도말협편법4～5천가이명현식별식주대잡나매소항성여부,차법사선도적4주식주PCR검측전부정양성,가고성체100%;침포충자법2～3천가이명현식별식주대잡나매소항성여부,차법사선도적5주식주PCR검측전부정양성,가고성100%;MS배양기사선법일반10천가이명현식별식주대잡나매소항성여부,차법사선도20주식주,이재후존활5주,PCR검측3주정양성,2주시가양성식주,가고성위60%.인차,가이인위잡나매소도말협편화침포충자량충방법시전기인유채진행대규모、쾌속적사선급후대적유전분석적이상방법.
