广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY
2010年
5期
678-680
,共3页
黄学勇%李永红%段广才%范清堂%郗园林
黃學勇%李永紅%段廣纔%範清堂%郗園林
황학용%리영홍%단엄재%범청당%치완림
幽门螺杆菌%omp22 基因%克隆%基因表达
幽門螺桿菌%omp22 基因%剋隆%基因錶達
유문라간균%omp22 기인%극륭%기인표체
目的:克隆幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22,构建幽门螺杆菌omp22基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据.方法:利用 PCR 技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增omp22基因,并将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果:PCR方法扩增的omp22基因长度约为540 bp.经酶切鉴定,插入到表达载体的基因片段与预期目的DNA片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为22 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%.结论:成功克隆并构建了omp22基因高效原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础.
目的:剋隆幽門螺桿菌外膜蛋白基因omp22,構建幽門螺桿菌omp22基因與麥芽糖結閤蛋白基因融閤錶達載體,併進行誘導錶達,鑒定融閤蛋白免疫原性,為幽門螺桿菌疫苗研究提供依據.方法:利用 PCR 技術從Helicobacter pylori鄭州分離株MEL-Hp27染色體DNA上擴增omp22基因,併將其剋隆到錶達載體pMAL-c2X中,轉化大腸桿菌(E.coli TB1),用IPTG誘導目的基因錶達,SDS-PAGE方法對錶達產物進行分析,Western blot鑒定其免疫原性.結果:PCR方法擴增的omp22基因長度約為540 bp.經酶切鑒定,插入到錶達載體的基因片段與預期目的DNA片段相一緻;SDS-PAGE結果顯示錶達產物分子量約為22 ku,融閤蛋白的錶達量約佔全菌總蛋白的26%.結論:成功剋隆併構建瞭omp22基因高效原覈錶達繫統,為幽門螺桿菌基因工程組分疫苗的研究奠定基礎.
목적:극륭유문라간균외막단백기인omp22,구건유문라간균omp22기인여맥아당결합단백기인융합표체재체,병진행유도표체,감정융합단백면역원성,위유문라간균역묘연구제공의거.방법:이용 PCR 기술종Helicobacter pylori정주분리주MEL-Hp27염색체DNA상확증omp22기인,병장기극륭도표체재체pMAL-c2X중,전화대장간균(E.coli TB1),용IPTG유도목적기인표체,SDS-PAGE방법대표체산물진행분석,Western blot감정기면역원성.결과:PCR방법확증적omp22기인장도약위540 bp.경매절감정,삽입도표체재체적기인편단여예기목적DNA편단상일치;SDS-PAGE결과현시표체산물분자량약위22 ku,융합단백적표체량약점전균총단백적26%.결론:성공극륭병구건료omp22기인고효원핵표체계통,위유문라간균기인공정조분역묘적연구전정기출.
