作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2011年
12期
2136-2144
,共9页
杨昆%张贺翠%Richard CONVERSE%朱利泉%杨永军%薛丽琰%罗兵%常登龙%高启国%王小佳
楊昆%張賀翠%Richard CONVERSE%硃利泉%楊永軍%薛麗琰%囉兵%常登龍%高啟國%王小佳
양곤%장하취%Richard CONVERSE%주리천%양영군%설려염%라병%상등룡%고계국%왕소가
自交不亲和%信号元件%蛋白质相互作用%酵母双杂交
自交不親和%信號元件%蛋白質相互作用%酵母雙雜交
자교불친화%신호원건%단백질상호작용%효모쌍잡교
从甘蓝型油菜与羽衣甘蓝柱头中克隆出ARC1与EXO70A1基因的编码区,序列分析显示推导的甘蓝型油菜ARC1比羽衣甘蓝ARC1少编码2个氨基酸,ARC1蛋白在羽衣甘蓝与甘蓝型油菜中存在45个氨基酸的差异,其序列相似度与一致性分别达到95.9%和93.9%;推导的EXO70A1在2种植物中仅有6个氨基酸的差异,其序列相似度与一致性分别达到99.4%和98.9%;EXO70A1蛋白在种内和物种间都保持着高度的保守性,其保守的程度高于ARC1.应用酵母双杂交系统检测2种蛋白质的相互作用,发现在二倍体酵母细胞中,全长的ARC1与EXO70A1之间存在较强的相互作用,能激活4个报告基因(ADE2、HIS3、AUR1-C和MEL1)的表达;去除C-端(包括臂重复区)316个氨基酸残基后的ARC1N与EXO70A1之间表现出较弱的相互作用,只能激活3个报告基因(ADE2、AUR1-C和MEL1)的表达,表明ARC1的臂重复区可能并不位于ARC1与EXO70A1的互作界面的核心区段,ARC1的N-端结构域对ARC1与EXO70A1互作起关键作用;同时发现不同ARC1-EXO70A1组合的互作强度相当,其可能原因是ARC1和EXO70A1在甘蓝与甘蓝型油菜中存在的这些序列差异并未影响ARC1-EXO70A1互作界面的构象.
從甘藍型油菜與羽衣甘藍柱頭中剋隆齣ARC1與EXO70A1基因的編碼區,序列分析顯示推導的甘藍型油菜ARC1比羽衣甘藍ARC1少編碼2箇氨基痠,ARC1蛋白在羽衣甘藍與甘藍型油菜中存在45箇氨基痠的差異,其序列相似度與一緻性分彆達到95.9%和93.9%;推導的EXO70A1在2種植物中僅有6箇氨基痠的差異,其序列相似度與一緻性分彆達到99.4%和98.9%;EXO70A1蛋白在種內和物種間都保持著高度的保守性,其保守的程度高于ARC1.應用酵母雙雜交繫統檢測2種蛋白質的相互作用,髮現在二倍體酵母細胞中,全長的ARC1與EXO70A1之間存在較彊的相互作用,能激活4箇報告基因(ADE2、HIS3、AUR1-C和MEL1)的錶達;去除C-耑(包括臂重複區)316箇氨基痠殘基後的ARC1N與EXO70A1之間錶現齣較弱的相互作用,隻能激活3箇報告基因(ADE2、AUR1-C和MEL1)的錶達,錶明ARC1的臂重複區可能併不位于ARC1與EXO70A1的互作界麵的覈心區段,ARC1的N-耑結構域對ARC1與EXO70A1互作起關鍵作用;同時髮現不同ARC1-EXO70A1組閤的互作彊度相噹,其可能原因是ARC1和EXO70A1在甘藍與甘藍型油菜中存在的這些序列差異併未影響ARC1-EXO70A1互作界麵的構象.
종감람형유채여우의감람주두중극륭출ARC1여EXO70A1기인적편마구,서렬분석현시추도적감람형유채ARC1비우의감람ARC1소편마2개안기산,ARC1단백재우의감람여감람형유채중존재45개안기산적차이,기서렬상사도여일치성분별체도95.9%화93.9%;추도적EXO70A1재2충식물중부유6개안기산적차이,기서렬상사도여일치성분별체도99.4%화98.9%;EXO70A1단백재충내화물충간도보지착고도적보수성,기보수적정도고우ARC1.응용효모쌍잡교계통검측2충단백질적상호작용,발현재이배체효모세포중,전장적ARC1여EXO70A1지간존재교강적상호작용,능격활4개보고기인(ADE2、HIS3、AUR1-C화MEL1)적표체;거제C-단(포괄비중복구)316개안기산잔기후적ARC1N여EXO70A1지간표현출교약적상호작용,지능격활3개보고기인(ADE2、AUR1-C화MEL1)적표체,표명ARC1적비중복구가능병불위우ARC1여EXO70A1적호작계면적핵심구단,ARC1적N-단결구역대ARC1여EXO70A1호작기관건작용;동시발현불동ARC1-EXO70A1조합적호작강도상당,기가능원인시ARC1화EXO70A1재감람여감람형유채중존재적저사서렬차이병미영향ARC1-EXO70A1호작계면적구상.
