CAJ | 학술논문

目的观察Gax基因转染对缺氧性肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡及其相关基因表达的影响.方法腺病毒介导Gax转染体外原代培养的PASMCs.透射电镜观察细胞凋亡形态;原位细胞凋亡检测法观察Ad-Gax转染前后在常氧和缺氧处理2 h、6 h、12 h、24 h、48 h大鼠PASMCs凋亡情况;免疫细胞化学法测PASMCs Bcl-2、Bax蛋白表达.结果透射电镜观察到Ad-Gax转染后PASMCs产生凋亡现象.未转染缺氧刺激前后,均无或可见极少量的阳性细胞;Ad-Gax转染后,如无缺氧刺激,也无或仅可见少量的阳性细胞,予缺氧刺激后,阳性细胞显著增多,尤其在转染后24～48 h更明显.转染组常氧、缺氧2 h、6 h、12 h、24 h、48 h细胞凋亡百分率均显著高于未转染组(P＜0.01).Ad-Gax转染前,与常氧时比较,缺氧刺激PASMCs后,Bax蛋白表达略为升高但无统计学意义;而Bcl-2蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).Ad-Gax转染PASMCs后,缺氧刺激使Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.01),Bax蛋白表达显著增高(P＜0.01).转染组细胞凋亡率与Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.53,P＜0.01).结论 Ad-Gax转染可诱导缺氧性PASMCs凋亡,其机制可能是通过上调Bax蛋白和下调Bcl-2蛋白的表达,尤其是通过降低Bcl-2/Bax比值实现的.
목적 관찰Gax기인전염대결양성폐동맥평활기세포(PASMCs)조망급기상관기인표체적영향.방법 선병독개도Gax전염체외원대배양적PASMCs.투사전경관찰세포조망형태;원위세포조망검측법관찰Ad-Gax전염전후재상양화결양처리2 h、6 h、12 h、24 h、48 h대서PASMCs조망정황;면역세포화학법측PASMCs Bcl-2、Bax단백표체.결과 투사전경관찰도Ad-Gax전염후PASMCs산생조망현상.미전염결양자격전후,균무혹가견겁소량적양성세포;Ad-Gax전염후,여무결양자격,야무혹부가견소량적양성세포,여결양자격후,양성세포현저증다,우기재전염후24～48 h경명현.전염조상양、결양2 h、6 h、12 h、24 h、48 h세포조망백분솔균현저고우미전염조(P＜0.01).Ad-Gax전염전,여상양시비교,결양자격PASMCs후,Bax단백표체략위승고단무통계학의의;이Bcl-2단백표체현저승고,차이유통계학의의(P＜0.05).Ad-Gax전염PASMCs후,결양자격사Bcl-2단백표체현저강저(P＜0.01),Bax단백표체현저증고(P＜0.01).전염조세포조망솔여Bcl-2/Bax비치정부상관(r=-0.53,P＜0.01).결론 Ad-Gax전염가유도결양성PASMCs조망,기궤제가능시통과상조Bax단백화하조Bcl-2단백적표체,우기시통과강저Bcl-2/Bax비치실현적.