棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2002年
1期
22-27
,共6页
焦改丽%李俊峰%李燕娥%赵俊峡%张换样%刘建卫
焦改麗%李俊峰%李燕娥%趙俊峽%張換樣%劉建衛
초개려%리준봉%리연아%조준협%장환양%류건위
棉花侧根%高效转化系统%检测萤光素酶基因(Lux)%核基因%基因组
棉花側根%高效轉化繫統%檢測螢光素酶基因(Lux)%覈基因%基因組
면화측근%고효전화계통%검측형광소매기인(Lux)%핵기인%기인조
利用陆地棉(Gossypium hirsutum cv.Cok-er312和G.hirsutum.晋棉7号,冀合321)8～12d无菌苗侧根10mm切段作为新的外植体与农杆菌LBA4404pBK9(35s::LUC::Nos)共培养将外源基因导入棉花,成功的获得转基因工程植株,提高了愈伤组织和转基因工程植株的转化效率.pBK9质粒上携带的萤光素酶基因[Lucif-erous(1ux)]为报告基因(reporter gene),新霉素磷酸转移酶基因(npt Ⅱ)为选择标记基因(markergene),经选择获得的转基因工程植株通过VedioImage System进行整株活体萤光素酶基因(1ux)活性表达检测,获得T.代和T1代萤光素酶基因(1ux)阳性表达植株.进行DNA分子杂交(Southern blot)分析,证明外源基因已经整合到棉花基因组中.转基因工程植株萤光素酶基因(1UX)和新霉素磷酸转移酶基因(npt Ⅱ)在自交后代中得到保持,外源基因呈核基因单一位点显性遗传.
利用陸地棉(Gossypium hirsutum cv.Cok-er312和G.hirsutum.晉棉7號,冀閤321)8～12d無菌苗側根10mm切段作為新的外植體與農桿菌LBA4404pBK9(35s::LUC::Nos)共培養將外源基因導入棉花,成功的穫得轉基因工程植株,提高瞭愈傷組織和轉基因工程植株的轉化效率.pBK9質粒上攜帶的螢光素酶基因[Lucif-erous(1ux)]為報告基因(reporter gene),新黴素燐痠轉移酶基因(npt Ⅱ)為選擇標記基因(markergene),經選擇穫得的轉基因工程植株通過VedioImage System進行整株活體螢光素酶基因(1ux)活性錶達檢測,穫得T.代和T1代螢光素酶基因(1ux)暘性錶達植株.進行DNA分子雜交(Southern blot)分析,證明外源基因已經整閤到棉花基因組中.轉基因工程植株螢光素酶基因(1UX)和新黴素燐痠轉移酶基因(npt Ⅱ)在自交後代中得到保持,外源基因呈覈基因單一位點顯性遺傳.
이용륙지면(Gossypium hirsutum cv.Cok-er312화G.hirsutum.진면7호,기합321)8～12d무균묘측근10mm절단작위신적외식체여농간균LBA4404pBK9(35s::LUC::Nos)공배양장외원기인도입면화,성공적획득전기인공정식주,제고료유상조직화전기인공정식주적전화효솔.pBK9질립상휴대적형광소매기인[Lucif-erous(1ux)]위보고기인(reporter gene),신매소린산전이매기인(npt Ⅱ)위선택표기기인(markergene),경선택획득적전기인공정식주통과VedioImage System진행정주활체형광소매기인(1ux)활성표체검측,획득T.대화T1대형광소매기인(1ux)양성표체식주.진행DNA분자잡교(Southern blot)분석,증명외원기인이경정합도면화기인조중.전기인공정식주형광소매기인(1UX)화신매소린산전이매기인(npt Ⅱ)재자교후대중득도보지,외원기인정핵기인단일위점현성유전.
