昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2004年
2期
171-177
,共7页
闵丽娥%李佳%刘克武%江琰%刘晓雯%刘鑫
閔麗娥%李佳%劉剋武%江琰%劉曉雯%劉鑫
민려아%리가%류극무%강염%류효문%류흠
意大利蜜蜂%蜂王浆%超氧化物歧化酶%分离%纯化%生化性质
意大利蜜蜂%蜂王漿%超氧化物歧化酶%分離%純化%生化性質
의대리밀봉%봉왕장%초양화물기화매%분리%순화%생화성질
以意蜂Apis mellifera 蜂王浆为材料,经过硫酸铵分段盐析,DEAE-Sepharose柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤,得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD),纯化倍数l04.00,比活力53.05 U/mg.该SOD经SDS-PAGE显示单一蛋白带.温度对该酶活力的影响较小.Cu、Zn、Fe和Mn等元素含量测定发现该酶只含有Cu和Zn.酶经圆二色谱测定后,其a螺旋、β折叠和无规则卷曲蛋白构型的含量分别为26.1%、53.8%和22.0%.等电聚焦电泳测得酶的等电点为4.69、4.85和5.0l.NR/R单向和双向SDSPAGE表明该酶含有链内二硫键.氨基酸组成分析发现该酶由约402个氨基酸残基组成,其中Asp、Gly、Leu、Ala、Glu和val的含量较高.脲可抑制SOD活性,并使其紫外光谱发生变化,荧光发射峰强度变小.溴乙酸(BrAc)抑制酶的活力,使其紫外光谱发生变化,荧光发射峰强度变小.二巯基苏糖醇(DTT)使酶的活力发生变化,紫外吸收峰增大,荧光发射峰变小.
以意蜂Apis mellifera 蜂王漿為材料,經過硫痠銨分段鹽析,DEAE-Sepharose柱層析和Sephacryl S-200凝膠過濾,得到純化的超氧化物歧化酶(SOD),純化倍數l04.00,比活力53.05 U/mg.該SOD經SDS-PAGE顯示單一蛋白帶.溫度對該酶活力的影響較小.Cu、Zn、Fe和Mn等元素含量測定髮現該酶隻含有Cu和Zn.酶經圓二色譜測定後,其a螺鏇、β摺疊和無規則捲麯蛋白構型的含量分彆為26.1%、53.8%和22.0%.等電聚焦電泳測得酶的等電點為4.69、4.85和5.0l.NR/R單嚮和雙嚮SDSPAGE錶明該酶含有鏈內二硫鍵.氨基痠組成分析髮現該酶由約402箇氨基痠殘基組成,其中Asp、Gly、Leu、Ala、Glu和val的含量較高.脲可抑製SOD活性,併使其紫外光譜髮生變化,熒光髮射峰彊度變小.溴乙痠(BrAc)抑製酶的活力,使其紫外光譜髮生變化,熒光髮射峰彊度變小.二巰基囌糖醇(DTT)使酶的活力髮生變化,紫外吸收峰增大,熒光髮射峰變小.
이의봉Apis mellifera 봉왕장위재료,경과류산안분단염석,DEAE-Sepharose주층석화Sephacryl S-200응효과려,득도순화적초양화물기화매(SOD),순화배수l04.00,비활력53.05 U/mg.해SOD경SDS-PAGE현시단일단백대.온도대해매활력적영향교소.Cu、Zn、Fe화Mn등원소함량측정발현해매지함유Cu화Zn.매경원이색보측정후,기a라선、β절첩화무규칙권곡단백구형적함량분별위26.1%、53.8%화22.0%.등전취초전영측득매적등전점위4.69、4.85화5.0l.NR/R단향화쌍향SDSPAGE표명해매함유련내이류건.안기산조성분석발현해매유약402개안기산잔기조성,기중Asp、Gly、Leu、Ala、Glu화val적함량교고.뇨가억제SOD활성,병사기자외광보발생변화,형광발사봉강도변소.추을산(BrAc)억제매적활력,사기자외광보발생변화,형광발사봉강도변소.이구기소당순(DTT)사매적활력발생변화,자외흡수봉증대,형광발사봉변소.