南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2007年
2期
83-88
,共6页
李建许%陈杰%蔡亚飞%刘健%徐世永%刘红林
李建許%陳傑%蔡亞飛%劉健%徐世永%劉紅林
리건허%진걸%채아비%류건%서세영%류홍림
胚盘细胞%嵌合体%转基因%狼山鸡
胚盤細胞%嵌閤體%轉基因%狼山鷄
배반세포%감합체%전기인%랑산계
试验Ⅰ:以狼山鸡为供体,AA肉鸡为受体,通过赤道开窗法制作了狼山鸡-AA肉鸡的嵌合体.共操作了108枚鸡蛋,孵化成活19只,孵化成活率17.6%.获得表型嵌合体鸡胚22枚,其中15只孵化成活,嵌合体率为13.9%.对2只嵌合体公鸡解剖发现,有1只的睾丸发育异常.PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现,2只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞.结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因鸡是可行的.试验Ⅱ:利用脂质体介导法,在体外将外源pEGFP质粒转入到鸡X期胚胎细胞中,培养8 h开始有外源基因的表达,体外培养12 h后获得了21.43%的转染效率.将转染后的鸡胚盘细胞移入到受体AA肉鸡的胚下腔,孵化6 d后在8个鸡胚中检测到有外源基因的存在,阳性率为40%(8/20).
試驗Ⅰ:以狼山鷄為供體,AA肉鷄為受體,通過赤道開窗法製作瞭狼山鷄-AA肉鷄的嵌閤體.共操作瞭108枚鷄蛋,孵化成活19隻,孵化成活率17.6%.穫得錶型嵌閤體鷄胚22枚,其中15隻孵化成活,嵌閤體率為13.9%.對2隻嵌閤體公鷄解剖髮現,有1隻的睪汍髮育異常.PCR擴增禽類W染色體特異性的重複序列髮現,2隻嵌閤體公鷄的性腺都嵌閤瞭供體異性的細胞.結果錶明所採用的嵌閤體製作方法製備轉基因鷄是可行的.試驗Ⅱ:利用脂質體介導法,在體外將外源pEGFP質粒轉入到鷄X期胚胎細胞中,培養8 h開始有外源基因的錶達,體外培養12 h後穫得瞭21.43%的轉染效率.將轉染後的鷄胚盤細胞移入到受體AA肉鷄的胚下腔,孵化6 d後在8箇鷄胚中檢測到有外源基因的存在,暘性率為40%(8/20).
시험Ⅰ:이랑산계위공체,AA육계위수체,통과적도개창법제작료랑산계-AA육계적감합체.공조작료108매계단,부화성활19지,부화성활솔17.6%.획득표형감합체계배22매,기중15지부화성활,감합체솔위13.9%.대2지감합체공계해부발현,유1지적고환발육이상.PCR확증금류W염색체특이성적중복서렬발현,2지감합체공계적성선도감합료공체이성적세포.결과표명소채용적감합체제작방법제비전기인계시가행적.시험Ⅱ:이용지질체개도법,재체외장외원pEGFP질립전입도계X기배태세포중,배양8 h개시유외원기인적표체,체외배양12 h후획득료21.43%적전염효솔.장전염후적계배반세포이입도수체AA육계적배하강,부화6 d후재8개계배중검측도유외원기인적존재,양성솔위40%(8/20).
