西南大学学报（自然科学版）
西南大學學報（自然科學版）
서남대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTHWEST AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2008年
2期
143-148
,共6页
蔡燕%翁亚光%施琼%徐远久%刘子杰%王应雄
蔡燕%翁亞光%施瓊%徐遠久%劉子傑%王應雄
채연%옹아광%시경%서원구%류자걸%왕응웅
着丝粒特异性蛋白质%CENP-Ⅰ%染色体不稳定性
著絲粒特異性蛋白質%CENP-Ⅰ%染色體不穩定性
착사립특이성단백질%CENP-Ⅰ%염색체불은정성
用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获得编码CENP-Ⅰ蛋白第1-293位氨基酸的CENP-Ⅰ cDNA序列, 采用基因体外重组法将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)内; 将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中, 用IPTG诱导表达、 Ni2+-NTA亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白质; 用纯化的蛋白质免疫家兔制备抗血清, 琼脂糖免疫双扩法和Western blot鉴定得到高效价的特异性抗CENP-Ⅰ抗体.
用RT-PCR的方法從Hela細胞總RNA中穫得編碼CENP-Ⅰ蛋白第1-293位氨基痠的CENP-Ⅰ cDNA序列, 採用基因體外重組法將其剋隆到原覈錶達載體pET-32a(+)內; 將重組質粒轉化到大腸桿菌BL21(DE3)中, 用IPTG誘導錶達、 Ni2+-NTA親和層析純化穫得高純度的重組蛋白質; 用純化的蛋白質免疫傢兔製備抗血清, 瓊脂糖免疫雙擴法和Western blot鑒定得到高效價的特異性抗CENP-Ⅰ抗體.
용RT-PCR적방법종Hela세포총RNA중획득편마CENP-Ⅰ단백제1-293위안기산적CENP-Ⅰ cDNA서렬, 채용기인체외중조법장기극륭도원핵표체재체pET-32a(+)내; 장중조질립전화도대장간균BL21(DE3)중, 용IPTG유도표체、 Ni2+-NTA친화층석순화획득고순도적중조단백질; 용순화적단백질면역가토제비항혈청, 경지당면역쌍확법화Western blot감정득도고효개적특이성항CENP-Ⅰ항체.
