CAJ | 학술논문

建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法.小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法.酶消化法于37℃分为4个处理组进行.处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、10、20 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35、50、75 min;处理3以0.3 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60、90、240 min;处理4以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA和0.3 g/L Ⅰ型胶原酶(1∶2)消化60 min,150 min.原代细胞纯化采用差速贴壁和反复差速贴壁法.传代采用胰酶两步消化法进一步纯化输卵管上皮细胞.组织块法原代培养成纤维细胞生长优势明显,传代纯化细胞效果不佳.用酶消化法原代培养时,处理1效果不理想;处理2采用3个消化时间时均取得比较理想的结果;处理3消化240 min时结果较好;处理4消化150 min效果较好.原代细胞纯化,反复差速贴壁得到的上皮细胞较纯,进一步传代纯化细胞取得了理想的结果.小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用酶消化法结合反复差速贴壁分离纯化细胞,传代采用两步消化法,可以成功地进行小鼠输卵管上皮细胞的分离纯化培养.
건립소서수란관상피세포원대배양급순화방법.소서수란관상피세포원대배양채용조직괴배양법화매소화법.매소화법우37℃분위4개처리조진행.처리1이2.5 g/L이매+0.4 g/L EDTA소화5、10、20 min;처리2이0.5 g/L이매+0.08 g/L EDTA소화35、50、75 min;처리3이0.3 g/L적Ⅰ형효원매소화60、90、240 min;처리4이2.5 g/L이매+0.4 g/L EDTA화0.3 g/L Ⅰ형효원매(1∶2)소화60 min,150 min.원대세포순화채용차속첩벽화반복차속첩벽법.전대채용이매량보소화법진일보순화수란관상피세포.조직괴법원대배양성섬유세포생장우세명현,전대순화세포효과불가.용매소화법원대배양시,처리1효과불이상;처리2채용3개소화시간시균취득비교이상적결과;처리3소화240 min시결과교호;처리4소화150 min효과교호.원대세포순화,반복차속첩벽득도적상피세포교순,진일보전대순화세포취득료이상적결과.소서수란관상피세포원대배양채용매소화법결합반복차속첩벽분리순화세포,전대채용량보소화법,가이성공지진행소서수란관상피세포적분리순화배양.